摘要 |
Un método para detectar una actividad quinasa o actividad fosfatasa que comprende los pasos: a) incubar una muestra con actividad quinasa o fosfatasa con una molécula sustrato quinasa o fosfatasa que comprende un fluoróforo con un marcaje detectable, b) incubar la mezcla del paso a) con una entidad de detección que comprende un grupo aromático que se selecciona de entre el grupo que consiste en los aminoácidos triptófano, tirosina y fenilalanina, y una pareja de unión, en la que ambas molécula de sustrato fosforilado y la entidad de detección son capaces de unirse a la pareja de unión y la unión de la molécula sustrato y la entidad de detección a la pareja de unión conduce a una lectura alterada del fluoróforo, en el que la lectura alterada del fluoróforo se debe al bloqueo estático o dinámico que resulta de la interacción directa de orbitales moleculares del fluoróforo de la molécula sustrato y el grupo aromático de la entidad de detección, y c) medir el marcaje del fluoróforo en la mezcla del paso b), en el que una lectura alterada del fluoróforo en comparación con el blanco es indicativo de la presencia de una actividad quinasa o fosfatasa en la muestra.
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