发明名称 利用长春花下胚轴培育再生植株的方法
摘要 一种生物技术领域的利用长春花下胚轴培育再生植株的方法,包括如下步骤:取长春花种子,置于MS培养基上培养,待长出第一对子叶之时,取下胚轴,置于愈伤组织诱导培养基上进行培养,得愈伤组织;将愈伤组织接种到分化培养基上进行培养,得绿色愈伤组织;将绿色愈伤组织接种到不定芽诱导培养基上进行培养,得不定芽;取不定芽,置入生根培养基中进行培养,得试管苗;取试管苗,利用快速繁殖培养基进行快速繁殖,得再生植株。本发明的方法使得长春花下胚轴的不定芽分化率达81%,不定芽生根率为100%。
申请公布号 CN101669446B 申请公布日期 2011.11.16
申请号 CN200910195774.3 申请日期 2009.09.17
申请人 上海交通大学 发明人 唐克轩;潘琪芳;王荃;袁芳;王国丰;刑世海;赵静雅
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 上海交达专利事务所 31201 代理人 王锡麟;王桂忠
主权项 一种利用长春花下胚轴培育再生植株的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,取长春花种子,置于MS培养基上培养,待长出第一对子叶之时,取下胚轴,置于愈伤组织诱导培养基上进行培养,得愈伤组织;步骤二,将愈伤组织接种到分化培养基上进行培养,得绿色愈伤组织;步骤三,将绿色愈伤组织接种到不定芽诱导培养基上进行培养,得不定芽;步骤四,取不定芽,置入生根培养基中进行培养,得试管苗;步骤五,取试管苗,利用快速繁殖培养基进行快速繁殖,得再生植株;其中,所述愈伤组织诱导培养基为:MS培养基+1.0mg/L 2,4‑二氯苯氧乙酸+1.0mg/L α‑萘乙酸+0.1mg/L玉米素+150mg/L水解乳蛋白+250mg/L脯氨酸+3%蔗糖+0.3%植物凝胶;愈伤组织诱导培养基的pH为5.8;所述分化培养基为:MS培养基+5.0mg/L 6‑苄基腺嘌呤+0.5mg/L α‑萘乙酸+150mg/L水解乳蛋白+250mg/L脯氨酸+3%蔗糖+0.3%植物凝胶;分化培养基的pH为5.8;所述不定芽诱导培养基为:MS培养基+1.75mg/L 6‑苄基腺嘌呤+0.55mg/L3‑吲哚乙酸+150mg/L水解乳蛋白+250mg/L脯氨酸+3%蔗糖+0.3%植物凝胶;不定芽诱导培养基的pH为5.8;所述生根培养基为:1/2MS培养基+0.3mg/L α‑萘乙酸+3%蔗糖+0.3%植物凝胶;生根培养基的pH为5.8;所述快速繁殖培养基为:MS培养基+3%蔗糖+0.3%植物凝胶。
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