一种鸢尾的组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种鸢尾的组培快繁方法，属于植物组织培养技术领域。方法包括：(1)培养基的配制；(2)鸢尾脱毒组培苗的培养；(3)组培苗的炼苗与移栽等步骤工艺。该方法通过对培养基激素种类、含量的调整与添加抗生素等技术手段，显著降低了鸢尾外植体的污染率，使接种成活率达到90％以上；也明显提高了外植体的诱导分化率，由已有技术的70-80％上升到99％，且提高了鸢尾组培的壮苗率。本发明可在园林绿化与组培企业中推广应用。

主权项

一种鸢尾的组培快繁方法，其特征在于按如下步骤进行：(1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的组分及其每升所含的重量与体积为：1)基本培养基：采用LS基本培养基，其中，白糖15‑30g/L，琼脂5‑8g/L，pH5.6‑5.8；2)芽诱导培养基：LS+山农一号5‑10ml/L+6‑BA 0.3‑1.0mg/L+NAA0.1‑0.3mg/L；3)继代增殖培养基：LS+6‑BA 0.5‑1.5mg/L+NAA 0.2‑0.5mg/L；4)壮苗培养基：LS+6‑BA 0.3‑0.5mg/L和NAA 0.5‑0.8mg/L；5)生根培养基：LS+NAA0.5‑1.5mg/L+GA0.3‑0.5mg/L；(2)鸢尾脱毒组培苗的培养：1)外植体的选择与灭菌：取健壮鸢尾植株的幼嫩地下芽，剪除基部以上叶片及根系，用10％洗洁精液浸泡8‑10min，流水冲洗1‑2h；于超净工作台上用无菌水冲洗，用70％酒精消毒30‑60s，0.1％升汞水溶液浸泡8‑15min灭菌后用无菌水冲洗5‑6次；将其茎尖组织块拨出，切成0.3‑0.5cm3的小块作为外植体，备用；2)芽诱导培养：将茎尖外植体接种到芽诱导培养基上，在25±2℃，光强1500‑2500Lx，光照12h/d条件下诱导培养15‑20天至形成丛生芽；3)芽增殖培养：将丛生芽转接到继代增殖培养基上，在25±2℃，光强1500‑2500Lx，光照12h/d条件下培养15‑25天至形成继代丛生芽；根据对丛生芽数量的需求，每隔10‑20天按同样方法进行一次再增殖；4)壮苗培养：将继代丛生芽转接到壮苗培养基上，在25±2℃，光强1500‑2500Lx，光照12h/d条件下培养20‑30天至苗高6‑8cm；5)生根培养：将上述壮苗转接到生根培养基中，在25±2℃，光强1500‑2500Lx，光照12h/d条件下培养15‑30天，至基部长出1‑5根根系即成鸢尾脱毒组培苗；(3)组培苗的炼苗与移栽：1)炼苗：将长高至10‑15cm、长根≥5根的组培苗带瓶移至普通大棚内，放置1‑3天后打开瓶盖，在25‑28℃，湿度70‑80％，光强7000‑8000lx条件下炼苗3‑5天；2)移栽与培养：将炼苗后的组培苗洗净根部培养基，用0.1％多菌灵溶液浸泡根部30‑60秒后，移栽至沙壤土∶泥炭∶黄壤土按体积6∶3∶1的混合基质中，用塑料薄膜覆盖并盖上遮阴网，在28‑30℃，湿度80‑95％，光强宜先弱后强，在＜10000lx条件下培育1周，后逐渐打开薄膜；2周后进入常规管理，其组培苗移栽成活率达95％以上；培养1‑2个月后，即成鸢尾种苗。