红毛藻藻红蛋白分离纯化的方法

摘要

本发明公开了一种红毛藻中藻红蛋白的分离纯化方法。它利用膜技术在脱盐的同时去除小分子量杂蛋白，利用阴离子交换树脂对藻红蛋白的结合强度在不同盐浓度和不同pH值的溶液中有明显变化等原理达到将藻红蛋白和杂蛋白有效分离的效果，获得高纯度和高得率的藻红蛋白。不同组分中的藻红蛋白纯度多数高于3.2(一般公认标准)，最高为5.5，得率约为0.8g/100g红毛藻。本方法工艺简单，分离效果好，实现了对藻红蛋白的快速有效分离纯化。

主权项

一种红毛藻中藻红蛋白的分离纯化方法，包括如下步骤：(1)提取：将红毛藻以1∶20‑25m/v比例溶于蒸馏水中，经过冻结‑融解、搅拌、组织捣碎、超声波破碎后，过滤、离心，上清液为粗提液；(2)盐析：向步骤(1)所得的藻红蛋白粗提取液中加入硫酸铵至其饱和度为35％‑50％盐析，离心，收集沉淀并用磷酸缓冲液(K2HPO4‑NaH2PO4)溶解，得盐析液，然后用30kDa分子量截留的超滤膜浓缩脱盐并去除分子量小于30kDa的杂蛋白；(3)吸附分离解吸：脱盐后的浓缩液经阴离子交换树脂吸附分离，藻红蛋白吸附在树脂上，吸附后的树脂经混合梯度的磷酸缓冲液淋洗解吸藻红蛋白，得到藻红蛋白。