发明名称 |
一种提高α半乳糖甘酶活性的方法 |
摘要 |
本发明的一种提高alpha半乳糖苷酶活性的方法,包括以下步骤:将α半乳糖苷酶基因(Genbank号:X03102)连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列(Genbank号:M28164)的N端,然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子(Genbank号:AY428072)下游MFα1信号肽序列(Genbank号:M17301)的C端,构建成表达框,表达框从N端到C端:GAL1启动子+MFα1信号肽序列+α半乳糖苷酶基因+α凝集素序列;将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。本发明的优点:将α半乳糖苷酶展露表达在酿酒酵母细胞壁外表面,实现酶与细胞外底物的完全接触,从而显著提高α半乳糖苷酶活性。 |
申请公布号 |
CN102242095A |
申请公布日期 |
2011.11.16 |
申请号 |
CN201010172791.8 |
申请日期 |
2010.05.14 |
申请人 |
浙江大学 |
发明人 |
阮晖;陈美龄;马风兰;陈赟;廖文艳;徐娟;王睿之;周陈伟;何国庆 |
分类号 |
C12N9/40(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/40(2006.01)I |
代理机构 |
杭州中成专利事务所有限公司 33212 |
代理人 |
金祺 |
主权项 |
一种提高α半乳糖甘酶活性的方法,其特征在于包括以下步骤:将α半乳糖苷酶基因连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列的N端,然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子下游MFα1信号肽序列的C端,构建成表达框,表达框从N端到C端:GAL1启动子+MFα1信号肽序列+α半乳糖苷酶基因+α凝集素序列;将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。 |
地址 |
310012 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |