发明名称 一种提高α半乳糖甘酶活性的方法
摘要 本发明的一种提高alpha半乳糖苷酶活性的方法,包括以下步骤:将α半乳糖苷酶基因(Genbank号:X03102)连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列(Genbank号:M28164)的N端,然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子(Genbank号:AY428072)下游MFα1信号肽序列(Genbank号:M17301)的C端,构建成表达框,表达框从N端到C端:GAL1启动子+MFα1信号肽序列+α半乳糖苷酶基因+α凝集素序列;将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。本发明的优点:将α半乳糖苷酶展露表达在酿酒酵母细胞壁外表面,实现酶与细胞外底物的完全接触,从而显著提高α半乳糖苷酶活性。
申请公布号 CN102242095A 申请公布日期 2011.11.16
申请号 CN201010172791.8 申请日期 2010.05.14
申请人 浙江大学 发明人 阮晖;陈美龄;马风兰;陈赟;廖文艳;徐娟;王睿之;周陈伟;何国庆
分类号 C12N9/40(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N 主分类号 C12N9/40(2006.01)I
代理机构 杭州中成专利事务所有限公司 33212 代理人 金祺
主权项 一种提高α半乳糖甘酶活性的方法,其特征在于包括以下步骤:将α半乳糖苷酶基因连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列的N端,然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子下游MFα1信号肽序列的C端,构建成表达框,表达框从N端到C端:GAL1启动子+MFα1信号肽序列+α半乳糖苷酶基因+α凝集素序列;将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。
地址 310012 浙江省杭州市西湖区浙大路38号