一种监测易变质低温流通货品货架寿命的方法

摘要

本发明公开的一种监测易变质低温流通货品货架寿命的方法，尤其涉及一种利用蛋白酶和酪蛋白反应的酶催化反应体系，以Folin-酚试剂作为指示剂的一种可以通过颜色变化显示时间、温度积累效应监测易变质低温流通货品货架寿命的方法。此监测方法可以用于实时监测低温物流中的食品、药品和工业用品的质量。本实用新型的监测易变质低温流通货品货架寿命的方法，可准确反应出时间、温度对易变质低温流通货品的品质的积累效应。

主权项

一种监测易变质低温流通货品货架寿命的方法，其特征是：以Folin‑酚试剂或其中的一种有效显色成分为显色剂，以酶催化反应的底物或产物的含量变化使显色剂产生颜色变化，从而通过显色剂颜色变化范围判定货品的货架寿命；其中：所述显色剂为Folin‑酚试剂或磷钼酸盐、磷钨酸盐、或可溶性铜盐；所述底物为可以经反应产生酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸的蛋白或酚类、柠檬酸、巯基化合物的聚合物；蛋白酶为天然蛋白酶或人工合成蛋白酶的一种或几种，或可催化生成酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸、酚类、柠檬酸、巯基化合物的天然酶或人工合成酶；蛋白酶溶液的配制：称取0.5克碱性蛋白酶粉，加入40ml水，在室温下放置1小时并加热搅动，之后将酶浸出液过滤，取滤液1ml用水稀释至20ml，即为稀释1600倍的酶液；底物溶液的配制：称取酪蛋白2克，置于150ml的三角瓶中，加入0.2M的磷酸氢二钠61ml，在45℃水浴条件下搅拌使溶解，再加入0.2M的磷酸二氢钠39ml，得到pH7的酪蛋白溶液，倾出上清液备用；显色剂的配制：在2L磨口回流瓶中，加入100克钨酸钠，25克钼酸钠及700ml蒸馏水，再加50ml的85％磷酸，100毫升浓盐酸，充分混合，接上回流管，以小火回流10小时，回流结束时，加入150克硫酸锂，50ml蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴，冷却后溶液呈黄色，如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤，稀释至1L，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存；使用时用标准氢氧化钠滴定，酚酞作指示剂，然后适当稀释，加水1倍，使最终的酸浓度为1N；碱性溶液的配制：将0.4mol的碳酸钠制成1L碳酸钠溶液，即为0.4M的碳酸钠溶液；酶催化反应体系的配制：将显色剂溶液与底物溶液以1∶10的比例进行混合，之后加入0.5ml的蛋白酶溶液，再加入一定量的碱性溶液，使混合溶液的pH值达到6.5～7.0之间。