丙型肝炎病毒抗体时间分辨免疫荧光分析法及试剂盒

摘要

本发明公开了丙型肝炎病毒抗体诊断时间分辨免疫荧光分析法及试剂盒，其选用多片段融合HCV重组抗原作为包被抗原，用碳酸钠缓冲溶液稀释至1-10ug/mL作为包被液；配对HCV重组抗原用生物素标记作为标记抗原；链亲和素用镧系元素标记；实验时用反应缓冲液按1∶21稀释使用；在包被抗原的反应板上，每孔依次加入25uL的HCV阴阳性对照或待测样品、以及稀释的生物素标记抗原，孵育洗板后在加入稀释好的链亲和素铕标记，孵育后进行荧光检测。本发明还提供相应的试剂盒。本发明具有较高的灵敏度、特异性及稳定性；且分析系统高度自动化，可提高临床检验结果的速度，可大幅度降低人为误差和增加检出结果的可靠性。

主权项

丙型肝炎病毒抗体时间分辨免疫荧光分析法，其特征是包括下列步骤：①固相抗体制备：将HCV重组抗原用碳酸盐缓冲溶液稀释至1 10ug/mL作为包被液，包被反应板，形成固相抗体，并用封闭液封闭；②生物素标记抗原的制备：用生物素对配对抗原进行标记；③镧系元素离子标记抗体制备：链亲和素用常规方法进行镧系元素离子标记；④在步骤①制得的具有固相抗体的反应板上，每孔加入HCV阴阳性对照或待测样品，以及用反应缓冲液稀释的标记抗原进行孵育，洗板后加入稀释好的铕标记链亲和素再次进行孵育，最后进行荧光测定。