一种猪瘟病毒强毒Shimen株和疫苗弱毒C株RT-PCR鉴别检测方法

摘要

本发明公开了猪瘟病毒强毒(CSFV)Shimen株和疫苗弱毒C株RT-PCR鉴别检测方法，包括以下步骤：(1)合成引物：CSFV强毒的检测引物CSFV-S-F/CSFV-S-R，CSFV弱毒的检测引物为CSFV-C-F/CSFV-C-R；(2)提取病毒RNA、合成cDNA模板；(3)PCR扩增，可从弱毒模板中扩增出1条256bp的条带；可从强毒模板中扩增出1条428bp的条带。该方法只需要在反转录之后进行一次PCR，适合一般实验室开展进行猪瘟病毒强毒和弱毒的鉴别检测，可以有效减少免疫未感染猪被误杀，而产生一定的经济效益。

主权项

一种猪瘟病毒强毒Shimen株和疫苗弱毒C株RT‑PCR鉴别检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)合成引物，参照GenBank收录的CSFV基因组序列，通过MegAlign软件对其序列进行了比较，在高度保守和强弱毒株有明显差异的区段设计引物：CSFV强毒的检测引物为CSFV‑S‑F/CSFV‑S‑R：上游引物(CSFV‑S‑F)：5’‑CAGAAACATCAAATAC‑3’(10666‑10681)；下游引物(CSFV‑S‑R)：5’‑CGTCGGCACAGATT‑3’(11093‑11080)；CSFV弱毒的检测引物为CSFV‑C‑F/CSFV‑C‑R：上游引物(CSFV‑C‑F)：5’‑CATGGAGGCGCTGGCA‑3’(7532‑7547)；下游引物(CSFV‑C‑R)：5’‑CACAAATTTCCTTCCGTCT‑3’(7796‑7778)；(2)提取病毒RNA、合成cDNA模板；(3)PCR扩增，可从弱毒模板中扩增出1条256bp的条带；可从强毒模板中扩增出1条428bp的条带。