发明名称 一种红外线辅助蛋白快速酶解方法
摘要 本发明属蛋白质组学技术领域,具体为一种红外线辅助蛋白快速酶解方法。本发明将红外线灯泡安装在一有通气孔的箱子中,在箱的侧壁安装风扇以调节箱内温度,风扇的启动和关闭通过连有热电偶的温度控制仪控制,热电偶探头置于箱中以探测其中的温度,从而构成可控温的红外线辅助蛋白酶解装置。将蛋白质与蛋白水解酶如胰蛋白酶溶解于缓冲溶液中,于上述酶解装置中进行红外线辅助酶解,酶解时间缩短为5到10分钟,而酶解结果与传统的溶液酶解相当。本发明用红外线代替传统蛋白溶液酶解技术中使用的水浴,显著提高了酶解效率,设备简单,可用于批量蛋白样品的高通量酶解和鉴定。本发明提出在蛋白质研究、生物医学研究以及食品药品分析等领域有良好的应用前景。
申请公布号 CN101323874B 申请公布日期 2011.11.02
申请号 CN200810036916.7 申请日期 2008.04.30
申请人 复旦大学 发明人 陈刚;王胜;张鲁雁;杨芃原
分类号 C12P21/06(2006.01)I;C12M1/38(2006.01)I 主分类号 C12P21/06(2006.01)I
代理机构 上海正旦专利代理有限公司 31200 代理人 陆飞;盛志范
主权项 一种红外线辅助蛋白酶解方法,其特征在于采用一种红外辅助蛋白酶解装置,该酶解装置由红外线灯泡、带有通气孔的箱子、风扇、热电偶和温度控制仪组成;其中,红外线灯泡安装在有通气孔的箱子中,风扇安装在箱子的侧壁以调节箱内温度,风扇的启动和关闭通过连有热电偶的温度控制仪控制,热电偶探头置于箱中以探测其中的温度;所述红外线灯泡发射红外线波长为1.72~16.66微米;酶解的步骤为:将蛋白质与蛋白水解酶溶解于缓冲溶液中,于波长1.72~16.66微米红外线照射下进行酶解,控制酶解温度为37℃,酶解时间为5到10分钟;其中,蛋白质在缓冲液中的浓度为1‑500纳克/微升,蛋白质与蛋白水解酶的质量比为1∶20‑1∶100。
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