小肽修饰表达两个外源基因的条件复制型溶瘤腺病毒载体及构建方法和应用

摘要

一种小肽修饰表达两个外源基因的条件复制型溶瘤腺病毒载体，在人腺病毒5型基因组2245bp-3327b之间有1083bp碱基的缺失，在人腺病毒5型基因组2245bp与3327bp之间处插入一个表达第一外源基因的表达元件，在腺病毒5型基因组第32679bp处即纤维蛋白HI loop处，插入编码含有一个小肽序列，在人腺病毒5型基因组32787bp与32788bp之间插入双表达第二外源基因与eGFP的表达元件。其构建方法为：构建pAd5E1B 55kd缺失的shuttle、构建pHE1B55D-第一外源基因的shuttle、构建pHE1B55D-第一外源基因/SwaI的腺病毒载体骨架、构建pshuttleAd5-E4-fiber-小肽序列shuttle、构建表达eGFP及第二外源基因的shuttle、制备小肽修饰表达两个外源基因的条件复制型溶瘤腺病毒载体。上述的腺病毒载体在制备治疗肿瘤药物中的用途。

主权项

一种小肽修饰表达两个外源基因的条件复制型溶瘤腺病毒载体，其特征在于：在人腺病毒5型基因组2245bp‑3327b之间有1083bp碱基的缺失，在人腺病毒5型基因组2245bp与3327bp之间处插入一个表达第一外源基因的表达元件，在腺病毒5型基因组第32679bp处即纤维蛋白HIloop处，插入编码含有一个小肽序列，在人腺病毒5型基因组32787bp与32788bp之间插入双表达第二外源基因与eGFP的表达元件；上述的小肽序列为RGD、SIKVAV、YGRKKRRQRRR、NGR、pK7序列中的任意一个。