一种用于乙型肝炎病毒基因耐药突变检测的试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种用于乙型肝炎病毒基因耐药突变检测试剂盒及检测方法，试剂盒包括用于PCR扩增乙型肝炎病毒基因P区的引物对、表面固定有耐药检测探针和对照探针的固相检测阵列、包含DNA聚合酶和反应底物的固相载体上核酸扩增反应体系和显色试剂。本发明通过以基因芯片为基础，PCR反应技术为原理的高通量、高特异性、快速、且易于推广的检测方法，将检测探针固定在检测阵列上，与PCR扩增的待测基因片段进行杂交，当目的片段被固相载体上的探针识别后，能够进行核酸序列的合成延长，使得被生物素标记的扩增片段固定在检测阵列上而不被洗脱，进而显色显示，就可以检测出待检测乙肝病毒的耐药突变产生情况。

主权项

一种用于乙型肝炎病毒耐药突变检测试剂盒，其特征在于，包括用于PCR扩增乙型肝炎病毒基因耐药突变检测的P区引物对、表面固定有耐药检测探针和对照探针的固相检测阵列、包含DNA聚合酶和反应底物的固相载体上核酸扩增反应体系和显色试剂；所述的P区引物对的5`端增加生物素标记；所述的耐药检测探针包括针对一个或多个乙型肝炎病毒耐药突变的耐药检测探针，其长度为15～25nt，其中针对检测突变位点设置在耐药检测探针5`端5nt之后，并在耐药检测探针5`端进行减少空间位阻的序列延长修饰和/或辅助固定修饰；所述的显色试剂包括含亲和素‑碱性磷酸酶的亲和反应液和含NBT/BCIP的显色反应液。