鉴别结核和非结核分枝杆菌的试剂盒及其使用方法

摘要

本发明是利用双通道荧光定量的优点，能够一次性区分鉴别结核和非结核分枝杆菌的荧光定量核酸检测技术，检测时间短，检测结果可靠而且能够定量。本发明的技术方案为提供一种鉴别结核和非结核分枝杆菌的试剂盒，包括对待测菌株进行PCR扩增的引物和荧光定量检测的探针。本发明通过不同分枝杆菌的基因序列的差异来设计荧光探针，区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌，从细菌的基因序列和分子结构水平来区分和鉴定，分类更准确，更可靠。解决了传统鉴定方法中通过细菌的生长形态来区分需耗时长达4-6周的问题。

主权项

一种鉴别结核和非结核分枝杆菌的试剂盒，包括对待测菌株进行PCR扩增的引物和荧光定量检测的探针，其特征在于，所述引物为上游引物MF1和下游引物MR1或上游引物MF2和下游引物MR2，所述引物能与分枝杆菌的特异片段结合，所述用于检测分枝杆菌设计的探针1其序列为M1、M2、M3中的任意一个，用于检测结核分枝杆菌设计的探针2序列为T1、T2、T3中的任意一个，所述探针1和探针2的3’端带有淬灭物质，所述探针1和探针2的5’端的荧光物质不同，所述上游引物MF1的核苷酸序列为序列表中的序列1；所述下游引物MR1的核苷酸序列为序列表中的序列2；所述上游引物MF2的核苷酸序列为序列表中的序列3；所述下游引物MR2的核苷酸序列为序列表中的序列4；所述探针M1的核苷酸序列为序列表中的序列5；所述探针M2的核苷酸序列为序列表中的序列6；所述探针M3的核苷酸序列为序列表中的序列7；所述探针T1的核苷酸序列为序列表中的序列8；所述探针T2的核苷酸序列为序列表中的序列9；所述探针T3的核苷酸序列为序列表中的序列10。