纯化细菌溶细胞素的方法

摘要

本发明涉及用于纯化例如肺炎球菌溶血素的细菌溶细胞素的方法。在去污剂和高盐存在时通过将可溶性凝集的溶细胞素结合到疏水作用层析材料的单个层析步骤产生了优良的溶细胞素的纯化。

主权项

一种用于细菌溶细胞素纯化的方法，所述方法包括以下步骤：a)培养表达细菌溶细胞素的细胞的培养物；b)从包含细菌溶细胞素的培养物中制备提取物；c)在0.6‑2M高盐条件下在pH6‑8下存在0.1‑5％(w/v)脂肪族去污剂时将包含于提取物中的可溶性凝集的细菌溶细胞素结合至苯基‑琼脂糖凝胶疏水作用层析材料；d)在0‑0.2M低盐条件下在pH6‑8下存在0.1‑5％(w/v)脂肪族去污剂时洗脱细菌溶细胞素；e)从细菌溶细胞素中除去去污剂；f)通过添加含有盐酸胍的变性剂溶解细菌溶细胞素；g)从细菌溶细胞素中除去变性剂。