基于自聚集短肽诱导的酶聚集体的蛋白质纯化方法

摘要

本发明提供了一种基于自聚集短肽诱导的酶聚集体的蛋白质纯化方法，其是将目的蛋白、含可切割位点的肽段(优选为内含肽)以及具有自聚集功能的短肽按从左至右或从右之左的顺序融合表达为三联体，在表达过程中形成酶聚集体，可通过离心或过滤方法与细胞裂解液中大部分可溶杂质分离；之后通过诱导可切割位点处的切割将目的蛋白从聚集体释放到溶液中，从而达到纯化目的。该方法具有成本低，流程简单的特点，可用于实验室规模的高通量蛋白纯化，也有利于工业规模的蛋白生产。

主权项

一种基于自聚集短肽诱导的酶聚集体的蛋白质纯化方法，其特征在于，1)将目的蛋白、含可切割位点的肽段和自聚集短肽的融合蛋白融合表达，所述的融合蛋白的连接顺序为目的蛋白‑含可切割位点的肽段‑自聚集短肽或自聚集短肽‑含可切割位点的肽段‑目的蛋白；2)将表达上述融合蛋白的宿主细胞破碎后，离心和/或过滤获得沉淀，然后利用与可切割位点对应的切割方式，诱导切割位点断裂释放可溶目的蛋白，最后进行离心和/或过滤，得上清。