发明名称 |
提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法 |
摘要 |
一种生物检测技术领域的提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法。包括如下步骤:交联固化细胞质蛋白:首先用戊二醛溶液处理完整细胞,使细胞质蛋白相互交联形成致密固体,离心收集戊二醛交联固化细胞;用蛋白酶解反应溶液悬浮戊二醛交联固化细胞,加入蛋白酶进行酶解反应;收集酶解多肽,进行除盐和富集,制备脱盐酶解多肽;用酶解多肽直接做LC-MS/MS检测,分析所得质谱数据,获得所需要的膜蛋白信息。本发明能够快速获得更多、更可靠的膜蛋白信息,有效减少LC-MS/MS检测中胞质蛋白的信号干扰。 |
申请公布号 |
CN102221586A |
申请公布日期 |
2011.10.19 |
申请号 |
CN201110073681.0 |
申请日期 |
2011.03.25 |
申请人 |
上海交通大学 |
发明人 |
李荣秀;徐泓;马贵军;邹琦;程超 |
分类号 |
G01N30/08(2006.01)I;C12P21/06(2006.01)I |
主分类号 |
G01N30/08(2006.01)I |
代理机构 |
上海交达专利事务所 31201 |
代理人 |
王锡麟;王桂忠 |
主权项 |
一种提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:第一步,交联固化细胞质蛋白:首先用戊二醛溶液处理完整细胞,使细胞质蛋白相互交联形成致密固体,离心收集戊二醛交联固化细胞;第二步,用蛋白酶解反应溶液悬浮戊二醛交联固化细胞,加入蛋白酶进行酶解反应;第三步,收集酶解多肽,进行除盐和富集,制备脱盐酶解多肽;第四步,用酶解多肽直接做LC‑MS/MS检测,分析所得质谱数据,获得所需要的膜蛋白多肽。 |
地址 |
200240 上海市闵行区东川路800号 |