主权项 |
以成熟胚为外植体的君子兰离体快速繁殖方法,其特征是具体步骤如下:1).外植体脱毒、接种及愈伤诱导:取成熟果实中的胚,放入无菌超净台中,用75%(体积/体积)酒精浸泡30~60秒,用0.1~0.2%(质量/体积)的升汞溶液浸泡2~5分钟,无菌水冲洗3~5遍,将裸胚上黄色致密的长度2mm的一端切下,接种在含2,4‑D 2~4mg/L、蔗糖3~4%(质量/体积)、琼脂0.45~0.7%(质量/体积)的MS培养基上,20~30℃每天40W日光灯照射8~9小时,40~50天继代一次,待黄色愈伤或者绿色膨大组织长到直径5mm时即诱导分化;2).不定芽的诱导:将生长状态良好的黄色愈伤或绿色膨大组织转接到诱导分化培养基:MS+KT 0.25~0.5mg/L+2,4‑D 0.75~1.5mg/L+3~4%(质量/体积)蔗糖+0.45~0.7%(质量/体积)琼脂,40~50天继代一次,20~30℃每天光照8~12小时;30~40天见再生芽产生,继代4个月时从一块愈伤分化出200多株再生芽苗;3).根的诱导:再生植株转到1/2MS+NAA 1~2mg/L+蔗糖2%(质量/体积)+琼脂0.45~0.7%(质量/体积)的生根培养基上,20~30℃每天10小时光照;4).再生植株移栽:植株生根后即可移栽,腐殖土121℃灭菌30~60分钟,移栽前将植株上的琼脂及杂物冲洗干净,7天浇一次透水便成活。 |