主权项 |
一种玫瑰再生为完整植株的方法,它包括以下步骤:1)玫瑰无菌苗获得:将玫瑰的茎段灭菌后再切成1‑2cm的带芽茎段,接种于初代培养基上进行初代培养得到玫瑰的无菌苗,然后在无菌苗增殖培养基上进行增殖和继代;2)体细胞胚诱导:切取继代培养的玫瑰无菌苗的未展开小叶,将其接种于体细胞胚诱导培养基,在黑暗条件下培养,直接诱导出体细胞胚;3)体细胞胚增殖培养:诱导出的体细胞胚接种于体细胞胚增殖培养基,在弱光条件下,进行体细胞胚的增殖和进一步分化,得到成熟体细胞胚;4)体细胞胚萌发成苗:将得到的成熟体细胞胚接种于体细胞胚萌发成苗培养基,在正常光照条件下,使其再生出植株;其中,初代培养基和无菌苗增殖培养基为:MS基本培养基,6‑BA0.5mg/L,NAA,0.01mg/L,琼脂7.5g/L和葡萄糖30g/L,加蒸馏水至1L,pH 6.0;所述体细胞胚诱导培养基成份如下:MS基本培养基,2,4‑D3‑4mg/L,葡萄糖30g/L,植物凝胶3g/L,加蒸馏水至1L,pH 6.0;所述体细胞胚增殖培养基成份如下:MS基本培养基,2,4‑D0‑0.5mg/L,6‑BA 0‑0.05mg/L,CH1.0g/L,葡萄糖30g/L,植物凝胶3g/L,加蒸馏水至1L,pH 6.0;所述体细胞胚萌发成苗培养基成份如下:1/2MS基本培养基或MS基本培养基,6‑BA 0‑0.4mg/L,葡萄糖30g/L,植物凝胶3g/L,加蒸馏水至1L,pH 6.0。 |