一种金纳米粒子比色法快速检测奶粉中三聚氰胺含量的方法

摘要

一种金纳米粒子比色法快速检测奶粉中三聚氰胺含量的方法，属于分析化学技术领域。本发明包括：金纳米粒子(AuNPs)的制备、冠醚的衍生化、金纳米粒子偶联冠醚、运用金纳米粒子自组装和分子识别检测三聚氰胺；实际样品检测等步骤。本发明制备了一种金纳米粒子的自组装材料，根据金纳米粒子体系的颜色变化，可简单、快速、灵敏的检测奶粉中的三聚氰胺含量，并且大大提高了检测的灵敏度，达到了高通量的目的，为以后的研究、生产、监管等提供了方便。

主权项

一种金纳米粒子比色法快速检测奶粉中三聚氰胺含量的方法，其特征在于利用金纳米粒子自组装和分子识别的比色方法检测奶粉中的三聚氰胺含量，表面修饰冠醚的金纳米粒子，加入三聚氰胺后，依靠冠醚与铵根离子的耦合作用，使得金纳米粒子发生自组装，体系由红色变为蓝色，金纳米粒子的特征吸收峰发生红移，由此检测体系中的三聚氰胺；包括以下步骤：金纳米粒子AuNPs的制备、冠醚的衍生化、金纳米粒子偶联冠醚、运用金纳米自组装和分子识别的比色方法检测三聚氰胺、和实际样品检测；(1)金纳米粒子AuNPs的制备：所用的玻璃仪器都经过王水浸泡，双蒸水清洗，晾干备用；制备时，向洁净的三角烧瓶中加入质量浓度为0.01％的氯金酸100mL，加热，煮沸，紧接着加入质量浓度为1％的柠檬酸三钠溶液2.4mL，边加热边搅拌，溶液颜色从淡黄色变成红色，反应持续6‑8分钟，然后，溶液冷却至室温，双蒸水补足到100mL，4℃保藏，所制得的金纳米粒子平均粒径为20nm；(2)冠醚的衍生化：①2‑羟甲基‑18‑冠醚‑6‑C6‑Br的制备称取0.11g、即4.5mmol浸在矿物油中的氢化钠，溶于5mL二甲亚砜溶液中，加入0.57g、即1.94mmol的2‑羟甲基‑18‑冠醚‑6，室温下搅拌30分钟，再加入1.55mL、即10.1mmol的1，6‑二溴己烷，室温下搅拌过夜，向反应溶液中加入甲醇猝灭，再进行减压蒸发，残留液用50mL二氯甲烷萃取，用50mL水洗三遍，过后用无水硫酸镁进行干燥10小时，过滤，得到的溶液经硅胶柱纯化，洗脱液为苯/石油醚体积比1∶1；②2‑羟甲基‑18‑冠醚‑6‑C6‑SH的制备称取0.49g、即1.08mmol 2‑羟甲基‑18‑冠醚‑6‑C6‑Br溶于10mL乙醇中，与0.4g、即5.5mmol硫脲充分混合后，加热回流过夜；用0.4g、即7mmol氢氧化钾加入到残留液中调节pH，继续回流2小时，加1M盐酸酸化；向反应残留液中加入50mL二氯甲烷萃取，50mL水洗三遍，过后用无水硫酸镁干燥10小时，过滤；得到的溶液用硅胶柱纯化，洗脱液为苯；(3)金纳米粒子偶联冠醚：取20mL金纳米粒子，用0.5M氢氧化钠溶液调节至pH 8；将衍生化的冠醚2‑羟甲基‑18‑冠醚‑6‑C6‑SH 2mL溶解于4.4mL乙醇中，取2滴加入到调节好pH的金纳米粒子溶液中，室温下搅拌2天，然后1000r/min离心15分钟，去上清，滤饼用超纯水稀释到原体积，4℃保存备用；(4)利用金纳米粒子自组装和分子识别的比色方法检测三聚氰胺：向偶联好的金纳米粒子溶液中加入不同浓度的三聚氰胺溶液标准品，金表面的冠醚与铵根离子偶联，使得分散的金纳米粒子聚集，体系由红色变为蓝色；根据A698/A525的比值与三聚氰胺的浓度建立标准曲线，三聚氰胺的检测限为6ng/mL，线性范围为10‑500ng/mL；(5)实际样品检测：取不同奶粉进行实际样品检测。