| 发明名称 |
肿瘤选择性复制型腺病毒-胸苷激酶基因构建体的获得及用途 |
| 摘要 |
本发明公开了一种人工改造人类5型腺病毒(Ad5)的构建方案，以及用该方案获取的一种肿瘤选择性复制型腺病毒构建体在肿瘤治疗中的具体用途，属于医学基因工程技术领域。用PCR扩增定点缺失、酶切、连接、克隆、同源重组、转染、腺病毒单克隆纯化等技术，获得的一种重组腺病毒构建体，其技术特征在于：Ad5基因组E1A保守序列2(CR2)区缺失27个碱基；E3区6.7k/gp19k基因的28530-29360nt缺失，同时在该缺失区插入HSV-TK全长cDNA(1131bp)片段。该构建体是一种具有高度的肿瘤选择性复制能力的新型溶瘤腺病毒载体，其利用HSV-TK的自杀基因作用和溶瘤病毒溶解肿瘤细胞的双重杀伤效应在肿瘤的生物治疗中具有独特的实用价值。 |
| 申请公布号 |
CN102206613A |
申请公布日期 |
2011.10.05 |
| 申请号 |
CN201010621092.7 |
申请日期 |
2010.12.26 |
| 申请人 |
周剑峰 |
发明人 |
周剑峰;马丁;韩志强;卢运萍;王世宣 |
| 分类号 |
C12N7/01(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N7/01(2006.01)I |
| 代理机构 |
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代理人 |
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| 主权项 |
一种肿瘤选择性复制型腺病毒构建体，其技术特征在于：该肿瘤选择性复制型腺病毒构建体称为Ad5/ΔE1A/Δ6.7k/gp19k/HSV‑TK，该构建体是在野生型Ad5(具体序列见核酸表)的基础上缺失了其第920‑946nt GAT CTT ACC TGC CACGAG GCT GGC TTT，该序列编码Ad5E1A蛋白的121至129位氨基酸，同时缺失E3区位于6.7k/gp19k基因区的第28530‑29360nt，在该缺失区域引入一个ClaI酶切位点；利用该酶切位点插入HSV‑TK基因的全长编码序列(1131bp，具体序列见核酸序列表)，其它基因组结构与野生型Ad5完全相同(详见说明书附图)。 |
| 地址 |
430030 湖北省武汉市硚口区解放大道1095号 |
