一种竹黄菌发酵生产漆酶的方法

摘要

一种竹黄菌发酵生产漆酶的方法，属于生物工程技术领域。本发明涉及利用竹黄菌株Shiraia sp. SUPER-H168保藏号为CCTCC NO：M 207104，已在ZL200710132510.4公开，通过液态发酵获得漆酶。目前未见竹黄菌(Shiraia bambusicola)产漆酶的研究报道。竹黄是一种药用真菌，具有很高药用价值和保健功效。竹黄发酵生产漆酶具有发酵周期短和酶活力高的优势，同时发酵过程还可产生高活性的超氧化物歧化酶(SOD)和苝醌色素，开发前景广阔。

主权项

一种竹黄菌发酵生产漆酶的方法，其特征在于出发菌株为：竹黄菌株（Shiraia sp.）SUPER‑H168，保藏号为CCTCC NO：M 207104；液态发酵培养基组成为：碳源5‑50 g/L，氮源5‑50 g/L，K2HPO4 2‑4 g/L，KH2PO4 2‑4 g/L，马铃薯汁200 g/L，用纯水配制；马铃薯汁的配置：称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000mL煮沸半个小时，纱布过滤得到滤液，所有滤液加入到培养基中，培养基终体积为1000 mL；液态发酵条件为：在发酵罐内装入发酵罐体积60%‑70%（v/v）的液态发酵培养基，灭菌冷却后接入竹黄菌，接种量为5%‑10%，种龄为10‑48小时，起始pH和发酵过程pH均为自然，发酵温度为24‑32℃，发酵周期为2‑5天；在发酵过程中添加表面活性剂，以提高漆酶的产量；所添加的表面活性剂选用：Tween 20、Tween 40、Tween 60、Tween 80、TritonX‑100、TritonX‑114、TritonX‑116、TritonX‑405、TX‑4、TX‑6、TX‑9、TX‑10、AEO‑3、AEO‑7、AEO‑9、一乙醇胺、二乙醇胺、或三乙醇胺；添加时间为发酵开始后的0‑40小时，使发酵液中表面活性剂质量浓度达0.1%‑2%，随后的发酵不再补加表面活性剂；所述碳源选用葡萄糖、果糖、可溶淀粉、麦芽糖、木糖、蔗糖、乳糖、或半乳糖；所述氮源选用无机铵盐、无机硝酸盐、蛋白胨、酵母膏、尿素、玉米浆、或豆饼粉。