一种含铈磁性纳米粒子用于脂肪酶的固定化技术

摘要

本发明采用无皂乳液聚合制备的P(AM-co-St)-Ce(III)磁性高分子纳米微球，在此基础上通过共价键固定脂肪酶，属于脂肪酶固定化技术领域。本发明的优点是：①第一次将含铈磁性纳米粒子用于脂肪酶的固定；②固定脂肪酶后的磁性纳米微球具有优异的磁分离能力，铈离子对固定化脂肪酶有明显的激活作用；③脂肪酶被固定化后其pH值稳定性、热稳定性、操作稳定性、贮存稳定性均比自由酶明显提高；④固定化后的脂肪酶的米氏常数比游离酶下降，说明脂肪酶在固定化后其结合底物的能力有所增强；⑤固定化脂肪酶具有从反应体系中易分离和回收，可循环利用，而且操作简便从而降低企业成本。

主权项

一种含铈磁性纳米粒子用于脂肪酶的固定化技术，主要过程为称取1.0g含铈磁性纳米粒子粉末于50mL三角烧瓶中，加入一定量含酶的缓冲液5mL，35℃条件下震荡(120r/min)反应30h，离心直到上清液中脂肪酶的偶联率大于95％，抽滤，用5℃的去离子水洗涤，得到固定化脂肪酶，并对纳米粒子进行了磁性分析，确定了纳米微球粒径、铈的质量分数、给酶量对固定化酶偶联率和活力回收的影响，和酶活的pH值稳定性、热稳定性、操作稳定性范围。