一种同时测定正品大黄中13个化学成分含量的HPLC方法

摘要

本发明提供一种HPLC-DAD法同时测定大黄中13个化学成分含量的方法，该方法包括样品提取和液相分离两个步骤：首先，取干燥的大黄药材粉末0.200g(60mesh)，精密称定，置10ml茶色容量瓶中，加入10ml甲醇，室温浸泡2h后超声30min，重复3次，合并提取液并过滤回收溶剂后用甲醇溶解并转移至25ml茶色容量瓶，定容并摇匀，作为供试品溶液；然后，进行高效液相色谱分析，色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(5μm，250mm×4.6mm，Agilent)；流动相：甲醇(A)-0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，流速：1.0ml/min，检测波长：280nm，232nm，柱温：30℃。本发明的方法经方法学验证准确可靠，可用于大黄药材的多指标成分的定量分析。

主权项

HPLC‑DAD法同时测定大黄中13个化学成分含量的方法，包括样品提取和液相分离两个步骤，其特征在于对大黄中的13个被测成分的充分提取和良好分离，采用Zorbax Eclipse XDB‑C18色谱柱分离，以甲醇‑0.05％磷酸水溶液为流动相作梯度洗脱。(1).标准溶液的配置分别称取13个对照品适量，精密称定，加甲醇制成CA，RG，ECG，RGG，LI，SB，HMG，SA，AE，RH，EM，CH，PH的混和对照品溶液作为储备液，密封4℃保存。(2).供试品溶液的制备取干燥的大黄药材粉末0.200g(60mesh)，精密称定，置10ml茶色容量瓶中，加入10ml甲醇，室温浸泡2h后超声30min，重复3次，合并提取液并过滤，回收溶剂后用甲醇溶解并转移至25mL茶色容量瓶，定容并摇匀，经微孔滤膜(0.45μm)滤过，HPLC分析。(3).液相色谱分离色谱柱：Zorbax Eclipse XDB‑C18色谱柱(5μm，250mm×4.6mm，Agilent)流动相：甲醇(A)‑0.05％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，见Table 3‑2流速：1.0ml/min检测波长：280±5nm，232±5nm柱温：30℃进样体积：10μlMobile‑phase gradien