发明名称 | 一种从脂肪组织中分离纯化许旺细胞的方法 | ||
摘要 | 本发明属于细胞生物学领域,涉及一种从利用脂肪组织分离、纯化许旺细胞的方法及其应用。该方法步骤包括:(1)无菌情况下剥离脂肪组织,切碎并清洗;(2)用3-20倍组织量的消化酶溶液消化脂肪组织碎块;所述的消化酶是酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液;(3)将得到的混悬液用吸管反复吹打3~5分钟;(4)对解离的细胞在600-1500g离心3-10分钟,得到细胞团块;(5)用许旺细胞培养液重悬步骤(4)得到的细胞接种于纤维粘连蛋白包被的培养皿。许旺细胞的纯度就可以接近95%。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的优质许旺细胞。 | ||
申请公布号 | CN102191220A | 申请公布日期 | 2011.09.21 |
申请号 | CN201010124579.4 | 申请日期 | 2010.03.12 |
申请人 | 上海市第一人民医院 | 发明人 | 秦金保;沈尊理;祝加学 |
分类号 | C12N5/079(2010.01)I | 主分类号 | C12N5/079(2010.01)I |
代理机构 | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人 | 吴桂琴;包兆宜 |
主权项 | 一种从脂肪组织中分离、纯化许旺细胞的方法,其特征在于,其包括步骤:(1)无菌情况下剥离脂肪组织,切碎并清洗;(2)用3‑20倍组织量的质量体积比为0.05~0.3%的消化酶溶液消化脂肪组织碎块45~90分钟;所述的消化酶是酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液;(3)将步骤(2)得到的混悬液用吸管反复吹打3~5分钟;(4)对步骤(3)中解离的细胞在600‑1500g离心3‑10分钟,弃上清,得到细胞团块;(5)用许旺细胞培养液重悬步骤(4)得到的细胞,以1×104‑5×104个/cm2接种于纤维粘连蛋白包被的培养皿。 | ||
地址 | 200080 上海市武进路85号 |