发明名称 一种从脂肪组织中分离纯化许旺细胞的方法
摘要 本发明属于细胞生物学领域,涉及一种从利用脂肪组织分离、纯化许旺细胞的方法及其应用。该方法步骤包括:(1)无菌情况下剥离脂肪组织,切碎并清洗;(2)用3-20倍组织量的消化酶溶液消化脂肪组织碎块;所述的消化酶是酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液;(3)将得到的混悬液用吸管反复吹打3~5分钟;(4)对解离的细胞在600-1500g离心3-10分钟,得到细胞团块;(5)用许旺细胞培养液重悬步骤(4)得到的细胞接种于纤维粘连蛋白包被的培养皿。许旺细胞的纯度就可以接近95%。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的优质许旺细胞。
申请公布号 CN102191220A 申请公布日期 2011.09.21
申请号 CN201010124579.4 申请日期 2010.03.12
申请人 上海市第一人民医院 发明人 秦金保;沈尊理;祝加学
分类号 C12N5/079(2010.01)I 主分类号 C12N5/079(2010.01)I
代理机构 上海正旦专利代理有限公司 31200 代理人 吴桂琴;包兆宜
主权项 一种从脂肪组织中分离、纯化许旺细胞的方法,其特征在于,其包括步骤:(1)无菌情况下剥离脂肪组织,切碎并清洗;(2)用3‑20倍组织量的质量体积比为0.05~0.3%的消化酶溶液消化脂肪组织碎块45~90分钟;所述的消化酶是酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液;(3)将步骤(2)得到的混悬液用吸管反复吹打3~5分钟;(4)对步骤(3)中解离的细胞在600‑1500g离心3‑10分钟,弃上清,得到细胞团块;(5)用许旺细胞培养液重悬步骤(4)得到的细胞,以1×104‑5×104个/cm2接种于纤维粘连蛋白包被的培养皿。
地址 200080 上海市武进路85号