一种通过NOS3基因拷贝数预测高原肺水肿发病风险的试剂盒

摘要

本发明涉及一种通过NOS3基因拷贝数预测高肺水肿发病风险的试剂盒，包括分离包装的NOS3引物混合液，Beta-actin引物混合液，PCR反应液，无菌去离子水，定值标准品，健康对照DNA，其特征是，所述的NOS3引物混合液中的上游引物和下游引物的序列为：F：5′-TGTCCAGAGGCTGCAAGG-3′和R：5′-AAGAAACAGGAAGCGGGTG-3′；所述的Beta-actin引物混合液中的上游引物和下游引物的序列为：F：5’-CGGGAAATCGTGCGTGACAT-3’和R：5’-GAAGGAAGGCTGGAAGAGTG-3’。本发明能用于平原人进入高原前对高原肺水肿易感者的筛选，指导高原肺水肿的预防和治疗，有利于进入高原人群健康；该试剂盒使用简单，操作方便，检测快速。

主权项

一种通过NOS3基因拷贝数预测高肺水肿发病风险的试剂盒，包括分离包装的NOS3引物混合液，Beta‑actin引物混合液，PCR反应液，无菌去离子水，定值标准品，健康对照DNA，其特征是，所述的NOS3引物混合液中的上游引物和下游引物的序列为：F：5′‑TGTCCAGAGGCTGCAAGG‑3′和R：5′‑AAGAAACAGGAAGCGGGTG‑3′；所述的Beta‑act in引物混合液中的上游引物和下游引物的序列为：F：5’‑CGGGAAATCGTGCGTGACAT‑3’和R：5’‑GAAGGAAGGCTGGAAGAGTG‑3’；所述的PCR反应液，含有PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、SYBR染料、Ex Taq酶；所述的定值标准品是用Beta‑act in的上下游引物在PTC‑200PCR仪中进行目的片段的扩增，得到含有目的片段的PCR产物，然后，将目的片段插入克隆载体pMD18‑T中，并将阳性克隆增菌后测序验证；从证实含Beta‑actin基因片段的菌液中提取质粒；所述的健康对照DNA是采集拟进入高原前的人员的静脉血2ml，并且到高原后在一周内没有发生高原肺水肿，然后，提取血液白细胞DNA，再将DNA浓度调为50ng/μl。