一种快速提取人参叶组织RNA的方法

摘要

一种快速提取人参叶组织RNA的方法，它涉及一种提取RNA的方法。它解决了现有提取人参叶组织RNA的方法存在步骤繁琐、耗时长、所用药品多和成本高的问题。方法：一、将人参叶组织在液氮中研磨成粉末，加提取缓冲液、β-巯基乙醇、Tris平衡酚和氯仿，震荡后在离心；二、离心后取上清，加Tris平衡酚和氯仿，震荡后离心，离心后取上清，加氯仿，震荡后离心；三、离心后取上清，加异丙醇，沉淀后离心，弃去上清液；四、用乙醇洗涤RNA沉淀，空气中晾干沉淀后即完成。本发明与传统的CTAB法等相比，提取效果比较好，时间短，容易操作；比商业试剂盒提取成本低。

主权项

一种快速提取人参叶组织RNA的方法，其特征在于快速提取人参叶组织RNA的方法按以下步骤进行：一、将200mg人参叶组织，洗净拭干后在液氮中研磨成粉末，然后加入到装有750μL提取缓冲液和75μLβ‑巯基乙醇的离心管中，再加入350μL Tris平衡酚和350μL氯仿，震荡5min后在13000r/min、4℃的条件下离心5min；二、离心后取上清，加入350μL Tris平衡酚和350μL氯仿，震荡5min后在13000r/min、4℃的条件下离心5min，离心后取上清，加入750μL的氯仿，震荡5min后在13000r/min、4℃的条件下离心5min；三、离心后取上清，加入等体积的异丙醇，混匀后于‑20℃沉淀20min，然后在13000r/min、4℃的条件下离心15min，弃去上清液；四、采用体积浓度为75％、冰浴的乙醇1mL洗涤RNA沉淀一次，空气中晾干沉淀，即完成快速提取人参叶组织RNA；其中步骤一中提取缓冲液：2％(质量)十二烷基硫酸钠、4mol/L尿素、0.1mol/L NaCl、0.01mol/L EDTA和0.05mol/L Tris‑HCL；步骤一中β‑巯基乙醇的体积浓度为10％。