发明名称 |
一种对转入玉米的Bar基因进行筛选的方法 |
摘要 |
本发明涉及一种对转入玉米的Bar基因进行筛选的方法。包括以下步骤:经过预培养的外植体接种于携带双元质粒p3300的农杆菌菌株EHA105的菌液中浸染,侵染后的外植体经共培养、含有草甘膦的筛选培养基I与筛选培养基II中筛选,再依次经过再生培养基I与再生培养基II中再生培养诱导形成胚状体和苗体,选择苗体盆栽得到的抗性植株,再用PCR检测和经凝胶电泳法证实筛选获得阳性植株为转基因植株。本发明采用草甘膦作为筛选剂来进行Bar基因的抗性筛选,极大的提高了筛选效率。 |
申请公布号 |
CN102181475A |
申请公布日期 |
2011.09.14 |
申请号 |
CN201110051769.2 |
申请日期 |
2011.03.04 |
申请人 |
天津大学 |
发明人 |
季静;王罡;汪婷婷;关春峰 |
分类号 |
C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A01H4/00(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/82(2006.01)I |
代理机构 |
天津市杰盈专利代理有限公司 12207 |
代理人 |
王小静 |
主权项 |
一种对转入玉米的Bar基因进行筛选的方法,其特征在于:包括以下步骤:经过预培养的外植体接种于携带双元质粒p3300的农杆菌菌株EHA105的菌液中侵染,浸染后的外植体经共培养、含有草甘膦的筛选培养基I与筛选培养基II中筛选,再依次经过再生培养基I与再生培养基II中再生培养诱导形成胚状体和苗体,选择苗体盆栽得到的抗性植株,再用PCR检测和经凝胶电泳法证实筛选获得阳性植株为转基因植株;所述的双元质粒p3300是在其上的T‑DNA区含有八氢番茄红素合成酶基因(PSY)和PPT乙酰转移酶基因(Bar)。 |
地址 |
300072 天津市南开区卫津路92号 |