一种构建群体遗传资源库的方法

摘要

本发明属于群体遗传资源库的构建领域，提供了一种科学地构建群体遗传资源库的方法，具体涉及贵州省17个世居少数民族遗传资源库的构建方案。该遗传资源库包括信息数据库、血浆样本库、总RNA备用库和DNA样本库。该遗传资源库具有以下特点：1、样本量大、结构多样化，能满足不同研究策略对样本的要求。2、资料齐全、可供持续研究：对每位对象都详细记录人口学、遗传病学和流行病学资料，并进行了临床体检、乙肝血清学检测以及各项血液生化与免疫检查，建立了系统的信息数据库。3、规范化的采集、保存和管理制度。4、建立了规范的从宣传动员，调查采样，临床体检，DNA提取等一套完整的遗传资源和标本收集的方法以及数据入库、实验室管理办法。

主权项

一种构建群体遗传资源库的方法，涉及贵州省17个世居少数民族遗传资源库的构建，其特征在于：构建遗传资源库包括以下步骤：(1)、准备采集对象居住所在地信息总表、问卷调查表、体检登记表、样本采集耗材、临床体检器材以及临床生化检测仪器，工作人员分组；(2)、研究人员调查并填写准备采集对象居住所在地信息总表，同时组织被采样人群到相应地点接受问卷调查并签订遗传资源调查知情同意书；(3)、体检组研究人员对被采样人群进行遗传学体征信息收集以及健康体检；(4)、采血组研究人员对被采样人群进行采血、采血管编号并登记相关内容；(5)、误餐费发放及收表组研究人员进行体检登记表的检查、补充及回收，误餐费的发放；(6)、实验处理组研究人员及时取适量EDTA.Na2抗凝管血液样本，加入适量RNA保护剂后‑80℃保存，以备后续总RNA的提取；(7)、实验处理组研究人员离心分离EDTA.Na2抗凝管血液样本中的血浆与血细胞，并对已分离的血液中血细胞部分进行基因组DNA的提取及定量；(8)、血液筛查组研究人员对已分离的EDTA.Na2抗凝管血液样本中血浆部分进行各类临床生化与免疫指标检测；同时对枸橼酸钠抗凝管血液样本进行血型鉴定和血常规检测；(9)、实验处理组研究人员对枸橼酸钠抗凝管中血液样本进行基因组DNA的提取及定量；(10)、建立贵州省17个世居少数民族遗传资源DNA样本库：将实验处理组研究人员抽提的样本基因组DNA核对编号后放入‑80℃超低温冰箱保存。(11)、建立贵州省17个世居少数民族遗传资源血浆样本库：将EDTA.Na2抗凝管血液样本中的血浆部分核对编号后放入‑80℃超低温冰箱保存。(12)、建立贵州省17个世居少数民族遗传资源总RNA备用库：将实验处理组研究人员加入了RNA保护剂的EDTA.Na2抗凝管血液样本置于‑80℃超低温冰箱保存，以备后续研究需要时的总RNA提取，进行mRNA表达研究；(13)、建立贵州省17个世居少数民族遗传资源信息数据库：遗传资源原始书面资料编号装订后存档，信息资料存入电脑，用Access软件建立系统详实的信息数据库，同时刻录光盘保存，并由专职研究人员负责数据库的记录管理工作。(14)、制定“贵州17个世居少数民族遗传资源库构建指南”以及“贵州17个世居少数民族遗传资源库规范化管理和样本的保存、领用守则”：建立规范的从宣传动员，调查采样，临床体检，DNA提取等一套完整的遗传资源和标本收集的方法以及数据入库、实验室管理办法。