一种采用全孢子接种工艺生产阿维菌素的方法

摘要

一种采用全孢子接种工艺生产阿维菌素的方法，属于微生物发酵技术领域。其工艺步骤包括：阿维链霉菌的斜面培养；制成孢子悬浮液；确定接种量；进行种子摇瓶培养；最后进行发酵培养，得到含有阿维菌素的发酵液。本发明通过对阿维链霉菌通过纯化培养、种子培养和发酵培养，最后得到阿维菌素，此方法设计合理，简单易行。通过确定孢子的接种量和孢子接种到发酵培养基的时机，确定了最优条件，本发明与挖块接种和菌丝接种相比，孢子接种方式不仅在接种量上易控制，发酵结果较稳定，效价增幅上比挖块接种及菌丝接种有优势，最大的效价达到4600μg/ml以上。

主权项

一种采用全孢子接种工艺生产阿维菌素的方法，其特征在于包括以下工艺步骤：(1)将阿维链霉菌接种至斜面培养基，在温度27‑29℃下，培养7‑9天；(2)取上述的阿维链霉菌孢子斜面，用无菌水振荡洗涤斜面制备成孢子悬浮液；(3)计算孢子悬浮液中孢子的数量，然后用移液管吸取孢子悬浮液至种子培养摇瓶中的种子培养基中，使每毫升种子培养基的孢子接种量为4×107‑6×107个，种子培养摇瓶装量为30‑50m1种子培养基/250ml摇瓶；(4)将步骤(3)的孢子悬浮液进行摇床培养，在温度27‑29℃下，转速为200‑300r/mim的旋转式摇床上培养40‑48小时，得到全孢子液；(5)取上述的全孢子液，按培养基体积3％‑7％的接种量，接种到发酵培养基中，进行摇床培养，发酵摇瓶装量为20‑40ml发酵培养基/250ml摇瓶，在温度27‑29℃下和湿度40％‑50％下，转速为200‑300r/mim的旋转式摇床上培养240‑260小时，得到含有阿维菌素的发酵液；上述的斜面培养基组分重量百分比为：酵母膏0.1％、麦芽糖0.1％、胰蛋白胨0.2％、葡萄糖0.4％、琼脂粉2％和蒸馏水余量，并使pH值调至7.2；上述的种子培养基含有：玉米淀粉30g/L、玉米浆5g/L、酵母膏15g/L、KH2PO44g/L和MgSO4·7H2O 0.2g/L，并调PH为7.0‑7.2；上述的发酵培养基含有：玉米淀粉120g/L、酵母粉15g/L、豆粕粉5g/L、花生饼粉5g/L和KH2PO40.5g/L，并调PH为7.0‑7.2。