发明名称 |
肺孢子菌的特异PCR检测试剂盒及其检测方法 |
摘要 |
本发明提供了一种肺孢子菌的特异PCR检测试剂盒,包括DNA裂解液,PCR反应液,阳性对照,阴性对照,并通过样本的预处理,样本DNA的提取,PCR扩增及PCR产物观察步骤提供了肺孢子菌的特异PCR检测试剂盒的检测方法,本发明的PCR检测试剂盒设计严谨,同时,此检测方法操作简单快速,灵敏性高,特异性强,结果判定准确客观。 |
申请公布号 |
CN102181541A |
申请公布日期 |
2011.09.14 |
申请号 |
CN201110086848.7 |
申请日期 |
2011.04.08 |
申请人 |
孟维娜 |
发明人 |
孟维娜;郭增柱;郭敏敏 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
南京苏科专利代理有限责任公司 32102 |
代理人 |
陆明耀;陈忠辉 |
主权项 |
1.肺孢子菌的特异PCR检测试剂盒,其特征在于:包括,DNA裂解液,PCR反应液,阳性对照,阴性对照;其中,所述DNA裂解液成分为:Nacl,浓度为120~200mM;Tris-HCl(pH 8.0),浓度为10~30mM;EDTA,浓度为1~20mM;SDS,体积浓度为2%;蛋白酶K,浓度50~150μg/μl;所述PCR反应液成分为:10×反应缓冲液:包含浓度为300~600mM的KCl,浓度为50~150mM的Tris-HCl(pH 9.025℃),体积浓度为0.5~1.5%的Triton<img file="FSA00000468423900011.GIF" wi="43" he="43" />X-100;MgCl<sub>2</sub>,浓度为15~30mM;dNTP,浓度为2~3mM;特异性引物1,浓度为1~20μM;特异性引物2,浓度为1~20μM;Taq酶,活性为1~100U/μl;其中特异性引物1为PCPF,特异性引物2为PCPR,碱基序列分别为:5′-GATGGCTGTTTCCAGTACTC-3′、5′-GTGTACGTTGCAAAAGCCCA-3′;所述阳性对照为肺孢子菌线粒体大亚基rRNA的一段特异性片段克隆得到的质粒;所述阴性对照为空白去离子水。 |
地址 |
215125 江苏省苏州市工业园区星湖街218号纳米科技园A3楼303室 |