一种亲和素/链亲和素磁性复合微粒及其制备方法与用途

摘要

一种亲和素/链亲和素磁性复合微粒及其制备方法与用途。其产品由内层的组装型金磁复合微粒和包覆于外层的亲和素/链亲和素生物分子构成。制备时用平衡盐溶液对组装型金磁复合微粒进行平衡；加入高生物素结合活性的亲和素/链亲和素生物分子，恒温下振荡混匀，反应；磁性分离，清洗即可。本发明解决了背景技术中通用性较差，标记量少，易使生物分子变性失活的技术问题。本发明可直接用于标记生物素化生物分子及生物素化非生物材料，标记后用于生物分子及非生物分子的富集、分离、纯化及检测等。本发明产品具有高生物素结合活性，可提高生物分析检测的灵敏度和特异性。制备方法简捷，可节省大量昂贵的生物试剂。检测过程更为简便。

主权项

一种亲和素/链亲和素磁性复合微粒的制备方法，该方法的实现步骤如下1)取组装型金磁复合微粒；2)用平衡盐溶液进行平衡(1)将平衡盐溶液放入离心管，使组装型金磁复合微粒分散于平衡盐溶液中；(2)用磁性分离器进行磁性分离，弃上清；3)加入1mg/ml 300μl的高生物素结合活性的亲和素/链亲和素生物分子；恒温下，一边振荡、混匀，一边进行反应；4)进行磁性分离，弃上清；以缓冲液清洗三次；5)加入封闭剂，封闭20‑120分钟；6)以500μl 0.02M的磷酸盐缓冲液pH＝7.4清洗三次即可；步骤2)所述的平衡盐溶液为0.02‑0.2M的三羟甲基氨基甲烷‑盐酸缓冲液，pH＝7.0‑7.6；或0.02‑0.2M的磷酸盐缓冲液，pH＝7.0‑7.6；或0.02‑0.2M的N‑2‑羟乙基哌嗪‑N’‑2‑乙磺酸盐缓冲液，pH＝7.0‑7.6；且平衡盐溶液中还加有0.1‑1.0M的NaCl；步骤4)所述清洗的缓冲液为500μl 0.02M的三羟甲基氨基甲烷‑盐酸pH＝7.4含有10mM的乙二胺四乙酸二钠盐和0.15M的NaCl的缓冲液。