发明名称 一种ε-聚赖氨酸的检测方法
摘要 本发明公开了一种ε-聚赖氨酸的检测方法,首先以标准溶液的扩散圈直径与ε-聚赖氨酸浓度对数值计算出标准曲线,然后测定样品溶液产生的扩散圈直径,从标准曲线上计算未知样品中ε-聚赖氨酸的浓度。本发明与目前的比色法和液相法相比,操作简便、成本低、专一性强,并且通过调整检测条件分别可以达到快速检测发酵液中ε-聚赖氨酸含量和高灵敏度检测食品中ε-聚赖氨酸含量的目的。
申请公布号 CN102175570A 申请公布日期 2011.09.07
申请号 CN201110023106.X 申请日期 2011.01.20
申请人 南京工业大学 发明人 徐虹;张全景;冯小海;李莎;欧阳平凯
分类号 G01N11/00(2006.01)I 主分类号 G01N11/00(2006.01)I
代理机构 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人 肖明芳
主权项 一种ε‑聚赖氨酸的检测方法,其特征在于它包括以下步骤:(1)亚甲基蓝琼脂平板的制备:按如下重量百分比配制亚甲基蓝琼脂平板:0.002~0.015%亚甲基蓝,0.75~10.0%琼脂,其余为水;(2)标准曲线的制作:将ε‑聚赖氨酸标准品溶于溶剂中,稀释成5~10个浓度梯度,作为ε‑聚赖氨酸标准溶液,溶剂配方与待测样品溶液中除ε‑聚赖氨酸之外的剩余组分的配方相同,溶剂需先进行预处理;在亚甲基蓝琼脂平板上放置无菌牛津杯或用无菌打孔器打孔,在每个牛津杯或孔中分别加入相同体积不同浓度梯度的标准溶液,盖上皿盖,然后置恒温箱扩散,扩散3~100h后,记录扩散圈直径大小;以标准溶液的ε‑聚赖氨酸浓度的对数值为自变量,扩散圈直径为因变量制作标准曲线;(3)样品溶液的制备:固体样品溶于溶剂再进行预处理,液体样品直接进行预处理,预处理后稀释至标准曲线ε‑聚赖氨酸的浓度范围,作为样品溶液;(4)样品的检测:在亚甲基蓝琼脂平板上放置无菌牛津杯或用无菌打孔器打孔,在牛津杯或孔中加入样品溶液,牛津杯或孔中样品溶液的加入体积与标准溶液的加入体积相同,盖上皿盖,然后置恒温箱扩散,扩散温度与标准溶液扩散温度相同,扩散时间与标准溶液扩散时间相同,测定扩散圈直径大小,从标准曲线上计算样品中ε‑聚赖氨酸的浓度。
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