一种获得转基因海岛棉的方法

摘要

本发明公开了一种获得转基因海岛棉的方法。只需要制备相应的农杆菌菌液，离心回收，加入1/2MS培养基、20％蔗糖、0.1‰(v/v)Selwet和0.1‰(v/v)DMSO，使之OD值达到0.6左右，装小喷壶，选取早晨刚展开的海岛棉花朵，对准柱头进行喷施，喷完后套纸管，做标记，待种子成熟后，种植转化T0代进行标记基因检测及PCR检测。该方法操作简单，不受基因型限制，转化效率较高，减轻了工作量，将会促进海岛棉基因转化研究，加快分子育种进程。目前，还未见有关海岛棉农杆菌侵染法转化的报道。

主权项

一种获得转基因海岛棉的方法，其特征在于，包括以下步骤：构建植物表达载体，将构建好的表达载体转化农杆菌，挑取阳性克隆，在YEB培养基上摇菌，待菌液浓度达到1.2‑1.6时，收集菌体，在收集的菌体中加入渗透培养基，混匀得到农杆菌悬浮液；将所述农杆菌悬浮液对刚展开的海岛棉花朵进行喷雾，喷雾后用套管套住该花朵，并做好标记，生育期结束收获转化种子，进入下一代种植，种植的F1代幼苗在3叶期时进行卡那霉素或除草剂检测；筛选不变色的植株进行PCR检测，获得转化阳性的F1代植株，进行Southern检测，所有阳性苗留种，种植并获得纯化转基因株系。