一种提高基因工程异戊酰螺旋霉素主组分含量的基因串连技术

摘要

本发明涉及基因工程技术在提高抗生素组分中的应用，具体来讲，涉及一种提高基因工程异戊酰螺旋霉素主组分含量的基因串连技术，它是将必特螺旋霉素基因工程菌中与螺旋霉素异戊酰基化密切相关的ist基因进行串连，通过增强其基因剂量提高产生菌异戊酰基化能力；同时也利用强启动活性的启动子红霉素抗性基因ermE基因启动子序列替换原ist基因启动子序列，以增强串连ist基因的表达，从源头提高基因工程菌产生异戊酰螺旋霉素主组分的比例。

主权项

一种可提高基因工程异戊酰螺旋霉素主组分含量的基因串连技术，其特征是，所说串连技术依次包括以下步骤：a、双拷贝ist基因的串连；b、采用链霉菌质粒载体及与螺旋霉素生物合成不相关的基因片段作为同源基因构建双拷贝ist基因同源重组质粒，或采用链霉菌整合型质粒及链霉菌强启动子构建双拷贝ist基因重组质粒；c、将双拷贝ist基因同源重组质粒转入螺旋霉素产生菌，或将链霉菌整合型强启动子双拷贝ist基因重组质粒转入异源变铅青链霉菌；d、双拷贝ist基因同源重组质粒在螺旋霉素产生菌中提高异戊酰螺旋霉素主组分含量，或整合型强启动子双拷贝ist基因重组质粒在变铅青链霉菌中异源表达提高螺旋霉素异戊酰化的鉴定。