多肽CW7213纯化工艺方法

摘要

本发明公开了一种多肽CW7213纯化工艺方法，属于生物化学领域中多肽技术领域。其特征在于，利用固相多肽合成方法合成多肽，将得到的粗肽加入纯水，温度保持在20-40度，用超声波振荡10-30分钟进行溶解。溶解后用0.22μm的膜过滤，得到澄清溶液，再进行离子交换制备液相色谱与反向制备液相色谱的分离纯化，即采用离子交换色谱柱和反相C18色谱柱，磷酸盐缓冲系统和含三氟乙酸的甲醇/水系统，进行色谱柱的平衡、进样、吸附、洗脱等工艺，最后进行转盐获得高纯度的多肽样品，实现化学合成多肽的小试制备。

主权项

一种化学合成多肽的分离纯化方法，其特征在于：①利用固相多肽合成方法合成多肽，将得到的粗肽加入纯水，温度保持在20‑40度，用超声波振荡10‑30分钟进行溶解；完全溶解后，膜过滤得到澄清溶液，得到CW7213的粗肽溶液，再先后进行离子交换色谱和反向高效液相色谱的分离纯化；②离子交换色谱分离，采用粒径为5μm的离子交换色谱填料，流动相为磷酸盐缓冲液与高氯酸钠磷酸盐缓冲液体系，流速1ml/min；③反相制备液相色谱分离，采用粒径为5μm的反向液相色谱填料，流动相为含三氟乙酸的甲醇/水溶液体系，流速2ml/min；④转盐，采用粒径为5μm的反相液相色谱填料，流动相为含醋酸的甲醇/水溶液体系，流速2ml/min；⑤将各收集组分，质谱分析目标产物，然后冷冻干燥，得到多肽成品。