发明名称 |
一种从组织中分离富集靶细胞的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种从组织中分离富集靶细胞的方法,属于生物科学和药物研发领域。该方法将组织制备成单细胞的悬浮液,利用阳性富集法将靶细胞从该细胞悬浮液中分离富集出来。本方法可以从不同处理状态下的组织中分离富集出靶细胞,为基础研究,临床研究,诊断,以及药物研发等提供足够量的,高度纯化的实验材料。 |
申请公布号 |
CN102174465A |
申请公布日期 |
2011.09.07 |
申请号 |
CN201110005376.8 |
申请日期 |
2011.01.12 |
申请人 |
武汉格蓝丽富科技有限公司 |
发明人 |
邓亚光;邓存常;邓伟平 |
分类号 |
C12N5/07(2010.01)I;C12N5/09(2010.01)I |
主分类号 |
C12N5/07(2010.01)I |
代理机构 |
北京市德权律师事务所 11302 |
代理人 |
周发军 |
主权项 |
一种从组织中分离富集靶细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将组织块在缓冲液中制备成单细胞的悬浮液;(2)对单细胞的悬浮液进行离心处理,除去上清液,加入胰蛋白酶处理;接着加入含有10%动物血清的细胞培养基,离心处理,除去上清液;最后加入含有10%动物血清的细胞培养基,转移到试管内;(3)向试管内加入磁珠,磁珠与悬浮液中的靶细胞相结合,在4℃或室温下培养30~60分钟;所述磁珠含有单一的靶细胞的表面抗体、细胞质内抗体或者两者都有,磁珠粒径为50nM~4.5uM,磁珠的浓度为单细胞悬浮液浓度的十分之一到五百分之一;(4)利用磁场器械将靶细胞从细胞悬浮液中分离富集出来;(5)加入缓冲液,清洗掉非特异性结合的非靶细胞;(6)抽离磁场,让与磁珠结合的靶细胞从磁场中释放出来,从而得到靶细胞。 |
地址 |
430075 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号 |