铵和磷酸盐离子在改进荧光素酶检测中的应用

摘要

本发明涉及利用生物荧光来检测酶活性的方法和试剂盒。更具体地，本发明涉及一种新的具有增加的光输出的检测系统，用于荧光素酶活性如荧光素酶报告酶活性的灵敏且便利检测。提供了一种检测样品中的荧光素酶活性的方法，包括在荧光素和ATP存在下孵育样品以使产生光信号，其中所述光信号通过在包括磷酸盐和铵离子的反应混合物中实施该孵育而被增强，以及检测该光信号。本发明还涉及在这样的方法中使用的试剂盒。

主权项

一种检测样品中的荧光素酶活性的方法，包括在荧光素和ATP以及二价阳离子存在下孵育所述样品以允许产生光信号，其中，所述孵育是在没有外源性加入或补充的含硫醇化合物下实施的，其中在荧光素‑荧光素酶反应中产生的总光输出通过在包括非硫醇还原剂、大于100mM的铵离子和至少60mM磷酸盐离子的反应混合物中实施所述孵育而被增强，以及检测所述光信号。