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一种制造可受配体调升之GPCR的方法，此方法包含将亲代GPCR的TM5-IC3-TM6片段修饰成取代的GPCR的步骤，使得TM5-IC3-TM6片段包含有GPCR调升座之胺基酸序列的取代，其中该胺基酸序列取代位于TM5之C端及TM6之N端，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2具有至少90%序列一致性之胺基酸序列，且其中包含含有该GPCR调升座之胺基酸序列取代之TM5-IC3-TM6片段的鼠类毒蕈硷类乙醯胆硷受体3(Rm3)亲代GPCR可受阿托品调升。如请求项1之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的已知GPCR。如请求项2之方法，其中已知GPCR是人类多巴胺受体D3。如请求项1之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的孤儿配体GPCR。如请求项4之方法，其中孤儿配体GPCR是人类GPR40。如请求项1之方法，其中亲代GPCR包含实质相连的报导蛋白质。如请求项1之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2具有至少95%序列一致性之胺基酸序列。如请求项1之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2序列一致之胺基酸序列。如请求项1之方法，进一步包含以下步骤：(a)在宿主细胞中制造该取代的GPCR；然后(b)比较该取代的GPCR在有配体存在时的可量测值，与该取代的GPCR在没有配体存在时的可量测值；其中取代的GPCR在宿主细胞中的含量若在有配体存在时可测出较没有配体存在时的含量更高，其即为可受配体调升的GPCR。如请求项9之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的已知GPCR。如请求项10之方法，其中已知GPCR是人类多巴胺受体D3。如请求项9之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的孤儿配体GPCR。如请求项12之方法，其中孤儿配体GPCR是人类GPR40。如请求项9之方法，其中亲代GPCR包含实质相连的报导蛋白质。如请求项9之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2具有至少95%序列一致性之胺基酸序列。如请求项9之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2序列一致之胺基酸序列。一种制造可受配体调升GPCR之编码核酸的方法，该方法包含将亲代GPCR的编码核酸之TM5-IC3-TM6片段编码核酸修饰成取代之GPCR的编码核酸的步骤，使得此TM5-IC3-TM6片段之编码核酸包含GPCR调升座的核苷酸序列取代，其中该经取代之GPCR中之GPCR调升座位于TM5之C端及TM6之N端，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2具有至少90%序列一致性之胺基酸序列，且其中包含含有该GPCR调升座之胺基酸序列取代之TM5-IC3-TM6片段的鼠类毒蕈硷类乙醯胆硷受体3(Rm3)亲代GPCR可受阿托品调升。如请求项17之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的已知GPCR。如请求项18之方法，其中已知GPCR是人类多巴胺受体D3。如请求项17之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的孤儿配体GPCR。如请求项20之方法，其中孤儿配体GPCR是人类GPR40。如请求项17之方法，其中亲代GPCR包含实质相连的报导蛋白质。如请求项17之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2具有至少95%序列一致性之胺基酸序列。如请求项17之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2序列一致之胺基酸序列。如请求项17之方法，进一步包含以下步骤：(a)在宿主细胞中制造该取代的GPCR；然后(b)比较该取代的GPCR在有配体存在时的可量测值，与该取代的GPCR在没有配体存在时的可量测值；其中核酸所编码的取代GPCR在宿主细胞中的含量若在有配体存在时可测出较没有配体存在时的含量更高，其即为可受配体调升GPCR的编码核酸。如请求项25的方法，其中亲代GPCR是原生或变化的已知GPCR。如请求项26之方法，其中已知GPCR是人类多巴胺受体D3。如请求项25之方法，其中亲代GPCR是原生或变化的孤儿配体GPCR。如请求项28之方法，其中孤儿配体GPCR是人类GPR40。如请求项25的方法，其中亲代GPCR包含实质相连的报导蛋白质。如请求项25之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2具有至少95%序列一致性之胺基酸序列。如请求项25之方法，其中该GPCR调升座包含与SEQ ID NO：2序列一致之胺基酸序列。一种辨认受测化合物是否为亲代GPCR之配体的方法，此方法包含以下步骤：(a)将受测化合物与如请求项1至16中任一项之可受配体调升的GPCR相接触，该可受配体调升的GPCR是表现于宿主细胞中；然后(b)比较该可受配体调升的GPCR在受测化合物存在时之第一可量测值，与该可受配体调升的GPCR在受测化合物不存在时之第二可量测值；其中若该第一量测值比第二量测值大，表示受测化合物是亲代GPCR的配体。如请求项33之方法，其中该宿主细胞包含表现载体，其含有可受配体调升之GPCR的编码多核苷酸。一种制备调节GPCR及/或治疗GPCR相关疾病之组合物的方法，其包含辨认出GPCR的配体，然后将载体与此配体混合，其中该配体是以如请求项33所述之方法所辨识出来。如请求项35之方法，其中该配体是GPCR的调节体。一种活体外调节GPCR的方法，此方法包括：将以请求项33之方法辨认出来的GPCR配体与GPCR相接触，其中该配体是GPCR的调节体。一种GPCR配体制造用于治疗GPCR相关疾病之药物的用途，其中该配体是以如请求项33之方法辨认出来，且其中该配体是GPCR的调节体。如请求项1至16中任一项之方法，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。如请求项17至32中任一项之方法，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。如请求项33之方法，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。如请求项34之方法，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。如请求项33之方法，其中进一步包含将该配体调配成医药组合物之步骤。如请求项34之方法，其中进一步包含将该配体调配成医药组合物之步骤。如请求项41之方法，其中进一步包含将该配体调配成医药组合物之步骤。如请求项42之方法，其中进一步包含将该配体调配成医药组合物之步骤。如请求项43至46中任一项之方法，其中该配体系为选自由促效剂、部份促效剂、反向促效剂及拮抗剂所组成群之调节体。如请求项35或36之方法，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。如请求项37之活体外调节GPCR之方法，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。如请求项38之用途，其中该亲代GPCR不为肾上腺素受体或其变体。 |
