发明名称 |
大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法 |
摘要 |
本发明公开了大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法,该方法包括如下几个步骤:(1)根据茂原链霉菌转谷氨酰胺酶酶原基因的核苷酸序列,设计PCR引物进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET22b(+)中,构建表达载体pET22b-proMTG,转化为大肠杆菌E.coli BL21/proMTG,该菌株保藏号为CCTCC M 208240;(2)可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原;(3)转谷氨酰胺酶酶原的激活;(4)高密度发酵;(5)蛋白纯化工艺。本发明方法的转谷氨酰胺酶产量及比活力达到直接在大肠杆菌中表达形成包涵体并经变性及复性生产该酶的水平,而且发酵生产工艺更简单。 |
申请公布号 |
CN101691560B |
申请公布日期 |
2011.08.31 |
申请号 |
CN200810220160.1 |
申请日期 |
2008.12.19 |
申请人 |
华南理工大学 |
发明人 |
潘力;杨慧林;苗小康;崔 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N9/10(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
广州粤高专利商标代理有限公司 44102 |
代理人 |
何淑珍 |
主权项 |
一种大肠杆菌E.coli BL21/proMTG,其特征在于:该菌株保藏号为CCTCC M208240。 |
地址 |
510640 广东省广州市天河区五山路381号 |