羊膜复合角膜缘干细胞膜片的制备方法

摘要

一种羊膜复合角膜缘干细胞膜片的制备方法。首先制备去上皮无菌羊膜片，再将上述得到的羊膜片的上皮面向下置于聚丙乙烯材料制成的套筒的端面上，用嵌入式培养小室扣在套筒的羊膜片上，即制成羊膜嵌套式培养模具；将该培养模具放置入铺有小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的6孔板的孔内，最后用消化法制备角膜缘干细胞细胞悬液并接种于羊膜片的上皮面上，每套培养模具接种2.0-3.0×105个角膜缘干细胞，培养10日后即得到羊膜复合角膜缘干细胞膜片。相比以往羊膜平铺法和乳胶圈羊膜固定法，本发明制备的羊膜复合角膜缘干细胞膜片的羊膜培养面很平坦，且角膜缘干细胞复层均匀，特别是具有临床应用方便羊膜不易破裂的优点。

主权项

一种羊膜复合角膜缘干细胞膜片的制备方法，其特征在于将羊膜嵌套式培养模具放置入铺有小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的6孔板的孔内，再用消化法制备角膜缘干细胞细胞悬液，并接种于上述羊膜嵌套式培养模具的羊膜片(3)上皮面，每套培养模具接种2.0‑3.0×105个角膜缘干细胞，培养10日后长满角膜缘干细胞即得到羊膜复合角膜缘干细胞膜片。