一种用于检测流感和H5N1亚型禽流感病毒的液相芯片和特异性检测引物及其制备方法

摘要

本发明涉及一种检测流感病毒的方法，尤其是一种借助液相芯片检测流感和H5N1亚型禽流感病毒的方法，属于医学监测技术领域。本发明是一种可以同时对甲(FluA)、乙(FluB)型流感病毒，包括H5N1亚型禽流感病毒进行分型鉴定的快速高效的检测方法。利用了液相芯片技术，运用生物信息学知识和相关的生物信息学软件，制作能够特异性识别H5、N1基因片段、甲型流感病毒的NP基因以及乙型流感病毒的HA基因片段的液相芯片。其优点是：能够对甲、乙型流感病毒，包括H5N1亚型高致病性禽流感病毒进行快速检测和早期诊断；并为开发其它各种亚型流感病毒的快速高效检测方法提供依据。其检测病毒种类多，反应时间短且灵敏度高的特性决定了本发明必将具有广阔的应用前景。

主权项

一种用于检测流感和H5N1亚型禽流感病毒的液相芯片和特异性检测引物，其特征是：所述液相芯片是由特异性检测探针与荧光微球偶联形成的特异性检测微球，所述特异性检测探针是在5’端加上C12分子臂和氨基修饰的特异性探针，所述特异性探针为：FluA‑probe TCAGGCCCCCTCAAAGCCGAH5‑probe CCGCAGTATTCAGAAGAAGCN1‑probe TGGTCTTGGCCAGACGGTGCFluB‑probe GCCATAGGAAATTGCCCAAT；所述特异性检测引物是对所有反向引物进行生物素标记的简并引物，所述简并引物为：FluA‑Forward GAGGTCGAAACGTAYGTTCTCTCTATFluA‑Reverse GGTCTTGTCTTTAGCCAYTCCATH5‑Forward GGTAACGGTTGTTTCGARTTCTATCAH5‑Reverse ATAGACCAGCYACCATGATTGCCAGN1‑Forward GGACYAGTGGGAGCAGCATAN1‑Reverse TGTCAATGGTRAAYGGCAACTCFluB‑Forward AAATACGGTGGATTAAATAAAAGCAAFluB‑Reverse CCAGCAATAGCTCCGAAGAAA。