基于环介导等温扩增技术的甲型肝炎病毒基因快速诊断试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开一种基于环介导等温扩增技术的甲型肝炎病毒基因快速诊断试剂盒及其检测方法，该试剂盒由两对引物、Bst DNA聚合酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂、稳定液、反应液、显色液和阳性对照液组成，所述两对引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示，以上八种液体分别置于容器中。本发明的试剂盒及其检测方法可高效高特异性地检测甲型肝炎病毒，它们是基于环介导等温扩增技术，应用六个区段，四条引物，一个恒定温度，在不到1小时即可完成扩增反应，检测成本低、耗时短、产率高，特异性高，且阴阳性结果显色差异显著，验证率高，更加明显可靠。

主权项

基于环介导等温扩增技术的甲型肝炎病毒基因快速诊断试剂盒，其特征在于由两对引物、Bst DNA聚合酶、逆转录酶、RNA酶抑制剂、稳定液、反应液、显色液和阳性对照液组成，以上八种液体分别置于容器中，上述两对引物为：外引物F3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；外引物B3，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；内引物FIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；内引物BIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；上述反应液含有1.6～2mmol/L dNTP、20～25mmol/L Tris‑Cl、10～12.5mmol/L氯化钾、10～12.5mmol/L硫酸铵、8～10mmol/L硫酸镁、0.1～0.125％TritonX‑100、0.8～1mol/L甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6～2mol/L和外引物F3/B3各0.2～0.25mol/L；上述阳性对照为携带甲型肝炎病毒基因的质粒DNA。