量子点标记过氧化氢酶荧光探针的制备方法

摘要

本发明公开了一种CdTe量子点标记过氧化氢酶荧光探针的制备方法，其步骤：A、制备碲氢化钾溶液：通过硼氢化钾还原碲粉制备；B、称取氯化镉晶体，用高纯水溶解定容，得氯化镉溶液；C、称取巯基乙酸，用高纯水稀释定容，得巯基乙酸溶液；D、取无氧高纯水，在搅拌和不断通入高纯氮气，分别加入氯化镉溶液、巯基乙酸溶液，用氢氧化钠溶液调节pH值，加入碲氢化钾溶液；E、将混合液分装于聚四氟乙烯消解罐中，氯化镉、碲氢化钾、巯基乙酸的摩尔比率；F、取CdTe量子点，加入N-羟基琥珀酰亚胺于恒温振荡，得量子点标记过氧化氢酶荧光探针。工艺简单，工艺参数易控制；具有很好的生物相容性；具有双重检测性能，同时可进行荧光检测与酶活性检测。

主权项

一种CdTe量子点标记过氧化氢酶荧光探针的制备方法，其步骤如下：制备碲氢化钾溶液：通过硼氢化钾还原碲粉制备，反应方程式如下：       4KBH4 + 2Te + 7H2O → 2KH4Te + K2B4O7 +11H2↑分别称取0.337g的硼氢化钾和0.319g的碲粉于具塞试管中，向硼氢化钾中加入5mL高纯水，至白色粉末完全溶解，后与碲粉混合，塞上塞子，于3‑‑5℃下反应8~16h，得紫黑色液体，取上清1ml，用无氧高纯水定容至100ml，为0.005mol/L的碲氢化钾溶液；B、称取0.228g氯化镉晶体，用高纯水溶解定容至100mL，得0.01mol/L的氯化镉溶液；C、称取0.092g巯基乙酸，用高纯水稀释定容至100mL，得0.01mol/L的巯基乙酸溶液；D、取无氧高纯水250mL，在搅拌和不断通入高纯氮气的条件下，依次分别加入50mL0.01mol/L的氯化镉溶液、60mL0.01mol/L的巯基乙酸溶液，用5mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为10.5~11.5，后加入40mL碲氢化钾 溶液，反应4‑6min；E、将（D）步骤的混合液以每罐50ml分装于聚四氟乙烯消解罐中，于100℃下微波加热10‑20min，即制得浓度为1 mmol/L CdTe量子点，氯化镉、碲氢化钾、巯基乙酸的摩尔比率分别为 2.5：1：3；F、取4mL制备好的浓度为1 mmol/L CdTe量子点，加入0.2mL0.5g/L的N‑羟基琥珀酰亚胺于37℃恒温振荡0.5‑1h，使偶联剂N‑羟基琥珀酰亚胺的羟胺基与CdTe量子点的羧酸基进行酯化反应，后加入0.5mL4×10‑10 mol/L的过氧化氢酶溶液，于25~35℃下振荡40~60min后，加入0.3mL、0.1mol/L的L‑甘氨酸终止交联，制得量子点标记过氧化氢酶荧光探针。