固定化双酶法制备N-乙酰神经氨酸

摘要

本发明公开了一种利用两种固定化酶混合来生产N-乙酰神经氨酸的工艺。该工艺使用固定化的0.6-10U/ml N-乙酰葡萄糖胺-2-差向异构酶(E.C.5.1.3.8)和1.2-10U/ml N-乙酰神经氨酸醛缩酶(E.C.4.1.3.3)在同一反应器中转化N-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸或其盐获得N-乙酰神经氨酸。本发明方法可以达到相对于N-乙酰葡萄糖胺77％的转化率并能在20小时完成转化反应，所使用的酶源可以反复使用多次，在工业生产上意义较大。

主权项

一种制备N‑乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，它包括步骤：(a)将N‑乙酰葡萄糖胺和丙酮酸或其盐与1.2‑10U/ml固定化N‑乙酰葡萄糖胺‑2‑差向异构酶和2.5‑5U/ml固定化N‑乙酰神经氨酸醛缩酶混合得到反应混合物；所述的反应混合物中还含有ATP、MgCl2，反应体系中pH为7‑9；(b)从反应混合物中分离得到N‑乙酰神经氨酸；所述步骤(a)中还包括添加丙酮酸或其盐，从而维持反应体系中丙酮酸或其盐的浓度为0.2‑0.6M。