发明名称 免疫测定法
摘要
申请公布号 申请公布日期 2011.08.21
申请号 TW093108320 申请日期 2004.03.26
申请人 森永制菓股份有限公司 发明人 村冈嗣朗;渡边由美子;境雅寿;本庄勉
分类号 G01N33/53 主分类号 G01N33/53
代理机构 代理人 陈长文 台北市松山区敦化北路201号7楼
主权项 一种免疫学测定法,其特征在于其系用于检测试料中之水难溶性/难萃取性蛋白质的存在者,其中该水难溶性/难萃取性蛋白质系选自膜结合型蛋白质或加工食品内之食物过敏原蛋白质,且该免疫学测定法包含以下步骤:(1)将试料中之水难溶性/难萃取性蛋白质以含有离子性界面活性剂的水性溶剂进行萃取及/或可溶化,其中该离子性界面活性剂可选自由十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸锂、月桂基肌胺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基氯化吡啶以及其混合物所组成之群,且该离子性界面活性剂的浓度为0.3%(W/V)~10%(W/V);(2)将以步骤(1)中所用之离子性界面活性剂预先改质的前述水难溶性/难萃取性蛋白质作为免疫原使用,将所得之抗体a)添加于上述步骤(1)中所得之蛋白质溶液中,该溶液未作实质性稀释,或者b)添加于上述步骤(1)中所得之蛋白质溶液稀释后的稀释液中,以使其离子性界面活性剂浓度不为0.03%(W/V)以下,亦不超过10%(W/V)之范围,藉此,于前述水难溶性/难萃取性蛋白质与前述抗体之间形成抗原-抗体复合体;以及(3)检测所形成之前述抗原-抗体复合体。如请求项1之免疫学测定法,其中步骤(2)中抗原-抗体复合体之形成系于至少超过0.3%(W/V)之离子性界面活性剂存在时进行。如请求项1之免疫学测定法,其中前述离子性界面活性剂系十二烷基硫酸钠。如请求项1之免疫学测定法,其中步骤(1)之水性溶剂进一步含有2-巯基乙醇。如请求项4之免疫学测定法,其中步骤(1)之水性溶剂包含1%(W/V)之十二烷基硫酸钠及1M之2-巯基乙醇。如请求项5之免疫学测定法,其中于步骤(1)中进一步包含煮沸该蛋白质溶液。如请求项6之免疫学测定法,其中前述煮沸系至少以80℃持续进行5分钟。如请求项7之免疫学测定法,其中前述蛋白质系选自由处于难萃取状态下之卵清蛋白、卵类黏蛋白、酪蛋白、β-乳球蛋白、荞麦蛋白质、小麦蛋白质以及花生蛋白质所组成之群。一种抗体,其特征在于其系适用于检测存在于包含离子性界面活性剂之水性溶剂中之蛋白质者,该抗体系针对以上述离子性界面活性剂改质之该蛋白质做为免疫原所调制者,且该抗体与以上述该蛋白质之天然型蛋白质作为免疫原所调制之抗体具有不同之免疫反应性;该离子性界面活性剂系选自由十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸锂、月桂基肌胺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基氯化吡啶及该等混合物所组成之群者,且该蛋白质系选自由卵清蛋白、卵类黏蛋白、酪蛋白、β-乳球蛋白、荞麦蛋白质、小麦蛋白质及花生蛋白质所组成之群者。如请求项9之抗体,其中该离子性界面活性剂系十二烷基硫酸钠。如请求项9或10之抗体,其中该蛋白质系在2-巯基乙醇存在下以该离子性界面活性剂改质者。
地址 日本