| 摘要 |
1. Способ диагностики папиллярной почечноклеточной карциномы (ППК), включающий следующие стадии: ! а) получение исходной пары образцов ткани от пациента, где один из образцов получен из предположительно пораженной раком ткани, а второй получен из прилегающей гистологически нормальной ткани («условной нормы»); ! б) выделение и очистка препаратов РНК из исходной пары образцов; ! в) синтез одноцепочечной или двуцепочечной кДНК на матрице РНК с использованием олигонуклеотидных праймеров; ! г) проведение количественной реакции амплификации фрагмента гена CALL с использованием кДНК, полученной на стадии в), в качестве матрицы и пары геноспецифичных олигонуклеотидных праймеров; ! д) сравнение количества амплифицированного фрагмента ДНК CALL для образца, полученного из предположительно пораженной раком ткани, с количеством амплифицированного фрагмента ДНК для образца, полученного из нормальной ткани, где указанные количества амплифицированного фрагмента ДНК отражают изменение содержания мРНК гена CALL, причем уменьшение содержания мРНК гена CALL служит диагностическим признаком ППК. ! 2. Способ по п.1, в котором последовательность праймеров и зонда представлена SEQ ID NO:1, 2 и 3. ! 3. Способ по п.1, в котором на стадии г) количественная реакция амплификации фрагмента гена CALL представляет собой ПЦР в режиме реального времени. ! 4. Способ по п.1, в котором на стадии д) в качестве внутреннего контроля для тканей почки используют гены GUSB и/или RPN1, кодирующие бета-глюкуронидазу и рибофорин 1 соответственно. ! 5. Набор праймеров и зонда для осуществления полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для количественной оценки сод� |
