鱼类加工废弃物皮、骨、鳞中胶原蛋白的提取方法

摘要

本发明公开了一种鱼类加工废弃物皮、骨、鳞中胶原蛋白的提取方法：主要步骤为：原料处理→菠萝蛋白酶水解去除非纤维蛋白→水洗→537酸性蛋白酶水解残渣胶原蛋白→常压过滤→冷冻干燥→干燥保存；其中重点在于酶解和胶原蛋白纯化。本发明提取的鱼下脚料胶原蛋白能得到纯度较高的制品，制品色泽洁白，无异味，平均提取率为38.9％，纯度为99.67％。

主权项

一种鱼类加工废弃物皮、骨、鳞中胶原蛋白的提取方法，其特征在于：主要步骤为：原料处理→菠萝蛋白酶水解去除非纤维蛋白→水洗→537酸性蛋白酶水解残渣胶原蛋白→常压过滤→冷冻干燥→干燥保存；其具体步骤为：(1)、原料预处理将鱼类下脚料解冻洗净，用粉碎机粉碎成小块组织，放入2.5％NaCl溶液5℃浸泡10‑20h进行脱脂后、6000r/min 5℃低温离心30min，去除废液；(2)酶解将预处理后的原料与去离子水按料液比1∶10混合，8000r/min进行匀浆)15min，按照15g/L加入菠萝蛋白酶，调pH至4.0～5.0，45℃酶解4h后过滤，滤液以8000r/min 5℃低温离心20min，取上清液；去上清液后将残渣与去离子水仍按料液比1∶10混合，匀浆15min，按照10g/L加入537酸性蛋白酶，调pH至7.0～8.0，45℃‑55℃酶解2h后过滤，滤液以8000r/min低温离心30min，取上清液；将两次取得的上清液混合，在100℃高温下加热3min灭酶活，滤液以8000r/min 5℃低温离心50min，取上清液；(3)胶原蛋白纯化在胶原蛋白的粗提取液中按照每100ml提取液加入3‑5g活性碳，后搅拌40min，活性炭吸附后的胶原蛋白初提液经过滤后用离心机以4500r/min离心2min，后倾出上清液，加NaCl至最终浓度为0.9mol/L盐析过夜后，用离心机以4500r/min离心20min收集沉淀，沉淀用0.5mol/L乙酸溶解即1g的沉淀中添加20ml乙酸，重复盐析和溶解操作1次，得到的胶原蛋白溶液移入透析袋，用蒸馏水透析3天，每天更换透析水2‑3次；(4)成品较纯的胶原蛋白提取液冷冻干燥。