用肠杆菌SY-8发酵生产铁型超氧化物歧化酶的方法

摘要

用肠杆菌SY-8发酵生产铁型超氧化物歧化酶的方法，涉及一种生物酶取液氮保藏的菌株阴沟肠杆菌SY-8，接入装有LB培养基的三角瓶中振荡培养使菌株复苏；将复苏后的菌液转接入发酵罐中发酵培养，加入诱导剂诱导培养后，得发酵液，离心，获得菌体，再重悬于磷酸缓冲液制得含菌体菌悬液，再将菌悬液破碎，然后通过离心去除细胞碎片，收集上清液，即为铁型超氧化物歧化酶粗酶液，再将铁型超氧化物歧化酶粗酶液经硫酸氨分级沉淀，得沉淀物再用磷酸缓冲液重悬后用丙酮沉淀，得纯化的铁型超氧化物歧化酶。铁型超氧化物歧化酶可清除机体代谢过程中产生过量的超氧阴离子自由基，延缓由于自由基侵害而出现的衰老现象，即延缓衰老和脂褐素沉淀的出现。

主权项

用肠杆菌SY‑8发酵生产铁型超氧化物歧化酶的方法，其特征在于，所述肠杆菌SY‑8(Enterobacter cloacae SY‑8)已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2011年02月28日，保藏中心登记入册编号为CGMCC No.4622；所述用阴沟肠杆菌SY‑8发酵生产铁型超氧化物歧化酶的方法包括以下步骤：1)取液氮保藏的菌株阴沟肠杆菌SY‑8，接入装有LB培养基的三角瓶中振荡培养，使菌株复苏；2)将复苏后的菌液转接入发酵罐中的LB培养基中发酵培养，并加入诱导剂，诱导培养后，即可获得发酵液；3)将发酵液离心，获得菌体，将菌体重悬于磷酸缓冲液制得含菌体菌悬液，再将菌悬液破碎，然后通过离心去除细胞碎片，收集上清液，即为铁型超氧化物歧化酶粗酶液，再将铁型超氧化物歧化酶粗酶液经硫酸氨分级沉淀，得到的沉淀物再用磷酸缓冲液重悬后用丙酮沉淀，即可得到纯化的铁型超氧化物歧化酶。