一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法

摘要

本发明公开了一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，它由摇瓶液体菌种培养、鸟嘌呤核苷发酵液制取两大工艺过程组成。选用了遗传稳定的保藏菌种GDGR-1006，在发酵过程中采用添加苹果酸和流加葡萄糖液、苹果酸的新工艺，克服了传统工艺育种技术落后、发酵培养基C∶N比例失调、菌种产苷不高、发酵周期长、转化率低等不足，菌种同步生产率和产苷水平高，发酵产苷水平高，鸟嘌呤核苷产率可达45g/L以上，转化率28％以上。

主权项

一种提高枯草芽孢杆菌发酵生产鸟嘌呤核苷产率的方法，其特征如下所述：(1)摇瓶液体菌种培养①选用枯草芽孢菌GDGR‑1006为保藏菌种，②将葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸、酵母粉、琼脂、水按比例配制成初级菌种培养基装入茄瓶，③在步骤②所述的初级菌种培养基中接入保藏菌种，静置培养后获得初级菌种，④将所述的初级菌种放入摇瓶培养基中，在往复式摇床上培养，获得摇瓶液体菌种；(2)高产率鸟苷发酵液制取①将葡萄糖液、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸、酵母粉、水按比例配制成二级菌种培养基，经蒸汽灭菌一段时间泵入二级种子罐，降温后再接入步骤(1)④所述的摇瓶菌种，并将经压缩、过滤后的无菌空气输入二级种子罐，培养后获得二级菌种，②将葡萄糖液、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸、酵母粉、水按比例配制成发酵培养基，蒸汽灭菌一段时间泵入发酵罐，降温后接入步骤(2)①所述的二级菌种，同时在步骤(2)①的保压、无菌空气输入的条件下，将经蒸汽灭菌、降温后葡萄糖液与苹果酸同时进行连续流加，发酵培养后获得鸟嘌呤核苷发酵液。