从太湖蓝藻中提取微囊藻毒素-LR的方法

摘要

本发明属于水处理应用领域，具体涉及一种从太湖蓝藻中提取微囊藻毒素-LR的方法。以太湖新鲜蓝藻为原材料，从中提取MC-LR的方法。主要包括蓝藻粉的制备，MC-LR的提取及提纯三个部分。采用一种以甲醇溶液为提取液，C18固相萃取柱为提纯工作站的MC-LR提取提纯方法，从而得到较高回收率的MC-LR纯品。本发明解决了传统研究过程中MC-LR样品缺乏，从国外进口价格昂贵，实验室研究成本较高的难题。为从事MC-LR研究提供了一种从太湖新鲜蓝藻中快速、经济提取MC-LR的方法。

主权项

从太湖蓝藻中提取微囊藻毒素‑LR的方法，其特征在于按照下述步骤进行：1）藻粉的制备方法：直接从水面上捞取新鲜蓝藻，用60‑100目筛网过滤后，得到新鲜藻泥，将藻泥置于阳光下暴晒干燥后磨碎，用60目筛网分筛得粉状藻粉，将收集的藻粉密封保存于冰箱中备用；2）MC‑LR的提取方法：称取藻粉加入质量浓度为10‑80%甲醇溶液中，其中藻粉与甲醇溶液的质量与体积比1：30‑70，磁力搅拌30 min‑180 min，使其混合成藻浆溶液，经超声振荡20 min后，在转速12000 r/ min下离心15 min，取上清液，并将残渣重复提取3次，合并上清液，旋转蒸发得到粗提液；用稀硫酸调其pH值至3‑4后静置1 h，在转速12000 r/min下离心20 min，得到浅黄色上清液或无色透明液体；上清液经0.45 μm滤膜过滤后加入5%稀氨水，调其pH值至7‑8；然后在1×105 Pa条件下灭菌15 min，得到含MC‑LR的粗提液；3）MC‑LR的提纯方法：依次用适量l00%甲醇和超纯水活化C18固相萃取柱，体积比为1:1，接着将含MC‑LR的粗提液以流速4 mL/min经C18固相萃取柱进行富集浓缩；然后用10‑40%的甲醇溶液淋洗C18固相萃取柱；C18固相萃取柱未干时再用40‑100%甲醇溶液洗脱吸附在固相上的MC‑LR，将洗脱液收集于收集瓶中用氮气吹干，加去离子水溶解残留的固体并稀释至所需体积；再经0.45 μm滤膜过滤后，即得到MC‑LR纯品。