一种麻风树的高效离体再生方法

摘要

本发明涉及一种麻风树的高效离体再生方法，是通过对麻风树无菌苗不同部位为外植体在分化培养基上再生频率的比较，筛选出下胚轴的再生率最高，并以麻风树下胚轴为外植体，分别接种到含有不同激素浓度的MS分化培养基上，筛选出比较理想的诱导再生培养基的配方为MS+1.0mg/L BA+2.0mg/L IAA，且不同生长激素浓度培养基诱导麻风树组培苗生根的结果显示在MS+1.0mg/L IAA培养基上生根效果最好。本发明的麻风树高效离体再生技术的建立可以使其遗传转化工作顺利进行，可获得较高的转化率和转化效果，为麻风树在采用现代生物技术手段育种方面奠定基础。

主权项

一种麻风树的高效离体再生方法，其特征在于：再生方法的步骤是：(1).挑取饱满的麻风树种子，经消毒处理后，剥去胚乳，将胚接种在MS培养基上萌发，得到无菌苗；(2).切取步骤(1)中得到的无菌苗下胚轴接种到MS+1.0mg/LBA+2.0mg/LIAA的分化培养基上诱导出再生的芽；培养条件是：培养温度控制在25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000lx；且MS+1.0mg/LBA+2.0mg/LIAA分化培养基需要附加3％蔗糖、0.7％琼脂，并调至pH5.8；(3).将步骤(2)中得到的下胚轴再生的芽接种到MS+1.0mg/LBA+2.0mg/LIAA的分化培养基上继代，进行增粗培养，得到长势粗壮的麻风树再生苗；培养基需要附加3％蔗糖、0.7％琼脂，并调至pH5.8，将接种的培养基放入培养室，培养温度控制在25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000lx；(4).将步骤(3)中长势粗壮的麻风树再生苗接种到MS+1.0mg/L IAA培养基上诱导生根；培养条件是：培养温度控制在25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000lx，且该培养基中需要附加2％蔗糖、0.7％琼脂，并调至pH5.8；(5).待步骤(4)中得到的麻风树再生苗根长到2～3cm时进行移栽，即完成麻风树的离体再生。